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请教:细胞形态的问题。     [复制链接]

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发表于 2010-5-31 15:57 |只看该作者 |倒序浏览 |打印
本帖最后由 细胞海洋 于 2010-5-31 22:13 编辑
* T; l4 ]& H: f' O/ r5 G. \
% q1 q# n, p( J这是hMSC传代后的细胞,按照先前传代的速度,7天就可以再次传代,但细胞出现生长缓慢,变扁平,是不是老化了?这是传代到第五代,这种情况正常吗?好像老化得太快了。
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发表于 2010-5-31 17:10 |只看该作者
你这是骨髓来源的MSC么?从形态变化来看,确实使细胞生长不好才会有的形态(我们实验室养的是脐带来源的MSC,生长不好也是这样),你注意看看培养条件有没有异常,如:培养箱是否出现异常,培养基成分有没有改变(特别是所使用血清的批号);还有就是你培养7天后细胞能长到什么程度才传代?我们的脐带MSC3天左右就能到符合传代的80%汇合度了。
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发表于 2010-5-31 17:11 |只看该作者
从图片上看,应该是老化了,尤其是第七天的。不过,你也可以看细胞是否被污染,尤其是支原体之类的,污染后细胞长的慢,状态不好。
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发表于 2010-5-31 19:14 |只看该作者
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觉得像污染了
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发表于 2010-5-31 20:36 |只看该作者
是不是传代后的细胞密度太低造成的?
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发表于 2010-5-31 21:52 |只看该作者
这不像是老化。应该是你传代的操作或者是培养箱的问题,如:培养液时间长后偏酸,消化时间长;二氧化碳流量,培养箱温度、水等。这些都能导致细胞损坏~!  hMSC老化状态是细胞看着有些黯淡,而且形状比较圆钝~~~
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发表于 2010-5-31 22:35 |只看该作者
咦?!真巧,我比你还惨,细胞还没传呢,原代细胞就这样。已经没有养的必要了,我就给扔了。

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发表于 2010-6-1 13:07 |只看该作者
细胞形态不太好!可能是污染了!你可以找你们老板问问!

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发表于 2010-6-1 13:17 |只看该作者
我也觉得像是老化了,其他细胞也会有这种情况吧,我的是原代分离的成纤维细胞,传过几代后,也变得扁平,没有立体感,细胞核、细胞边界不明显,成长速度慢,我也很困惑啊!但是在同一代还没有发现这种现象。我觉得你的细胞可能是接种密度太低,导致长不起来,变得越发扁平
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发表于 2010-6-1 14:48 |只看该作者
现在想想,如wuxiao101325 所说的培养基成分有没有改变(特别是所使用血清的批号);培养过程确实更换了血清,先前所用是GIBICO的血清,中途用完了,就用了师姐的四季青,但是其他接种板的细胞好像没什么问题。可能是接种密度?总感觉细胞培养过程中会出现种种问题,这让我们最后做结论的时候会比较心虚。无法做到同质性。
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