看看我的 小鼠iPS细胞经过 EB分化的问题（附图）

shewawa

回复 1# 上海过客 ! g) A5 ^/ c+ E+ k9 t; {+ d( H
EB 分化胚胎干细胞的要求很高，你的胚胎干细胞必须制作精良。和液体没什么关系，) _2 w* _) x2 W) ?; V2 c5 E! J
问题1：浓度不是很重要，iPS的好坏有关，我做过十个干细胞的分化也没失败。1000000也没失败，所以我觉得这个没有关系。
5 M" Z" Z! [" p# l9 c, E) v/ K3 ]) O问题2：每天换液一次，换一半
* k3 `  R* ?+ O1 C% J问题3：DMEM FBS NEAA 2-M L-grutamin P/S具体浓度估计都是一样的，你找论文看就行了。
, _$ [; [" l- X# b  j* h. ]2 B问题4：不清楚，估计是死了。实验室有人的EB也变成那样了，不过我没问为什么。
, f1 X2 J% ?& s4 }4 s! U3 U7 {
1 Y& l1 [6 a+ J8 }6 c( l希望能帮到楼主。也希望有问题能和楼主讨论。* c" g: J* B7 M2 ~
请问你说的细胞跳动是怎么回事？是在做心肌细胞分化吗？

上海过客

回复  上海过客
2 X5 Z6 x) G* s( o& IEB 分化胚胎干细胞的要求很高，你的胚胎干细胞必须制作精良。和液体没什么关系，% T1 y, G; K. p( \/ s! ~* x% n3 F
问题1： ...
  X! B2 P2 f) a/ T8 w4 k( m5 sshewawa 发表于 2010-6-28 00:46

7 U5 {$ u! q' t" l$ Q( ^. w- F4 e. v4 i5 M9 b& j" d

! k9 ~3 Z% p9 z' S$ I谢谢帮助 ，  是 做的 分化 ，但是不是做心肌分化，就是自由分化

cortex

回复 8# 上海过客
2 x/ H; B( c8 P+ E4 C" c  t3 @! P  ^0 Q9 F  R% s

/ t$ E8 \  t% E& W+ T    我们一般是刚开始隔天加一倍培养基，（起始0.5ml）后面细胞长起来后隔天换液（1ml）。

yanyuanmm

小弟，你是换液的时候把中间的吹掉了吧

amazingt

我做EB都不换液的，拿60mm的平皿加足够的培养液，不换液一样可以形成EB。而且细胞密度无所谓了，多少都可以

juan880929

起始细胞密度最好是1000个细胞每滴，只要能够形成EB，细胞量尽量控制小一点，还有看看是不是饲养层没有去除干净

juan880929

好的EB中间应该有很多囊状空泡

pheebs

没有具体的protocol吗

rain2402

这个不是很清楚。学习学习

iytbxxg

我都想知道怎样做的