看看我的 小鼠iPS细胞经过 EB分化的问题（附图）

shewawa

回复 1# 上海过客 # S; a9 o% {% w( [+ J3 d" V
EB 分化胚胎干细胞的要求很高，你的胚胎干细胞必须制作精良。和液体没什么关系，4 }0 @6 Z7 }' N2 ?* q3 V0 L. B: t; s! D+ W
问题1：浓度不是很重要，iPS的好坏有关，我做过十个干细胞的分化也没失败。1000000也没失败，所以我觉得这个没有关系。
! |, k; r# k" T# ~问题2：每天换液一次，换一半
/ b, M' t; T; J; O9 z: r% a% [, x问题3：DMEM FBS NEAA 2-M L-grutamin P/S具体浓度估计都是一样的，你找论文看就行了。- J' H: P* }4 K: J; Q
问题4：不清楚，估计是死了。实验室有人的EB也变成那样了，不过我没问为什么。
1 r. [: G: m, u* c- h' s! I$ _3 ~6 x6 i
希望能帮到楼主。也希望有问题能和楼主讨论。3 v# O+ s/ K& e0 ]
请问你说的细胞跳动是怎么回事？是在做心肌细胞分化吗？

上海过客

回复  上海过客
* o% x8 v. e& [% ?0 m6 b9 ]EB 分化胚胎干细胞的要求很高，你的胚胎干细胞必须制作精良。和液体没什么关系，, F% _% ]: [6 i3 L6 a& v
问题1： ...0 C7 e. a- M3 |0 P" K3 F9 z
shewawa 发表于 2010-6-28 00:46

! N" x# k  a& o

" q! R& F& y+ h: M4 ]; Z% K* e6 z: H3 k9 c9 N6 I7 o- u
谢谢帮助 ，  是 做的 分化 ，但是不是做心肌分化，就是自由分化

cortex

回复 8# 上海过客
" w) O& A  B6 k1 l7 Q: Z& f2 [( I) r, Z; [, O

4 O9 n1 H- S1 j1 ]+ a' v% M; Q; v    我们一般是刚开始隔天加一倍培养基，（起始0.5ml）后面细胞长起来后隔天换液（1ml）。

yanyuanmm

小弟，你是换液的时候把中间的吹掉了吧

amazingt

我做EB都不换液的，拿60mm的平皿加足够的培养液，不换液一样可以形成EB。而且细胞密度无所谓了，多少都可以

juan880929

起始细胞密度最好是1000个细胞每滴，只要能够形成EB，细胞量尽量控制小一点，还有看看是不是饲养层没有去除干净

juan880929

好的EB中间应该有很多囊状空泡

pheebs

没有具体的protocol吗

rain2402

这个不是很清楚。学习学习

iytbxxg

我都想知道怎样做的