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楼主: 上海过客
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MEF 到底是一种什么性质的细胞?是单一的细胞?肌纤维细胞,神经纤维细胞?   [复制链接]

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发表于 2010-7-6 22:15 |只看该作者
回复 40# treestem 4 [+ b6 m3 u- Q8 e# v; s
  ^$ T6 X" H3 X2 i

+ l9 T- B! m3 X$ Y3 `% U9 V    同意版主的看法。如果ips果真来源干细胞,不妨做一个对照实验,在相同培养基中培养,这样经过传代,分离纯化,也应该能够得到所谓的ips样细胞。
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金话筒 优秀会员

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发表于 2010-7-7 00:07 |只看该作者
回复  treestem ( t2 t; S) H+ c+ n
! U0 q& B1 `: M# a7 L4 n
' m$ m7 J4 i1 ^2 Q
    同意版主的看法。如果ips果真来源干细胞,不妨做一个对照实验,在相同培养基中培 ...
: b& D1 [3 L4 T8 W# j7 V: W9 |( tcortex 发表于 2010-7-6 22:15
" `5 T5 e4 n! q

, z3 M; s$ @2 r5 p. [) Q/ Q
3 A: _# Y  u4 l2 Z0 ?这 正是需要做的 工作 。   用ES 培养基培养 MEF ,把那些 聚集的 团块挑出来 。
# w" }3 r8 `& w* y. x8 W% o4 M0 M/ P" ]
是不是 有可能 得到  多能 干细胞呢  ?
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金话筒 优秀会员

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发表于 2010-7-7 00:11 |只看该作者
个人觉得,MEF细胞成份应该来说不是很均匀,但是随着传代,应该是越来越单一了。至于里面有没有干细胞,我想 ...( i! P& R" z( w3 b6 s* X  Z0 Y
cortex 发表于 2010-7-6 10:45
0 W4 \' M8 a0 E& \+ N# \, {

, F) u# S3 @1 s, o. _' u1 为什么 传代 后  会单一  ?            分化 了吗 ?. {( ?# \3 g# S
2  理论上说可以传8代 。           但是 加了VC 后 可以多传几代 是什么 原因呢
' w4 W& d# ^' L4 }/ H, s- Y
2 p2 H9 |  Y* ~
( l" w. ]9 C, Q, C1 G: [0 q. s我觉得 这都是很有意思的  问题  啊   。  VC 那篇文献 是 广州  做的  ,大家应该都 知道吧
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发表于 2010-7-19 10:57 |只看该作者
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学习啦

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发表于 2011-6-16 20:28 |只看该作者
回复 上海过客 的帖子0 k9 i/ A" R* s  ]9 k/ K, S/ f
" M% T! W% B2 u. t7 Z# _
可以发一下广州vc那篇文献吗? 谢谢

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发表于 2011-6-16 21:08 |只看该作者
回复 上海过客 的帖子
, Q7 r5 i' S) a; o- u6 i
, ]# m" n& ^; \/ \6 k8 {" O* o这篇文章介绍了vc可以减少p53的表达量,缓解细胞的衰老。至于第一个问题,如果里面有干细胞肯定会分化的,单一只是形态上的,是不是全都一样的细胞目前好像毫不清楚
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发表于 2011-6-16 21:08 |只看该作者
打错字了 是还不清楚

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金话筒 优秀会员

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发表于 2011-6-18 10:14 |只看该作者
MEF里不会是一种纯细胞,但随着代数的增加会变纯
4 g$ [  m* ?& _2 F6 z9 e  C3 H4 j. t5 n" |, J( z' ~7 B# s% o% B6 a
最近的一篇文章有没有看过(附件中), F2 o0 o+ Q- j9 [. f# G; K
Multilineage-differentiating stress-enduring (Muse)1 v. g; ~$ ]8 r5 p8 c* I
cells are a primary source of induced pluripotent) j: [4 A. Q- l* k9 F! Q, h# Y
stem cells in human fibroblasts4 L: e% O0 s, I$ j
Shohei Wakaoa,1, Masaaki Kitadaa,1, Yasumasa Kurodaa, Taeko Shigemotoa, Dai Matsusea, Hideo Akashia,  H( ]4 W" C  ^
Yukihiro Tanimuraa, Kenichiro Tsuchiyamaa,b, Tomohiko Kikuchia, Makoto Godac, Tatsutoshi Nakahatad,2 o- Z  [4 b- m6 x0 c( k; w( A
Yoshinori Fujiyoshic, and Mari Dezawaa,25 f5 h+ m/ b3 ?+ j9 ?
Departments of aStem Cell Biology and Histology, and bDermatology, Tohoku University Graduate School of Medicine, Sendai, Miyagi 980-8575," i: M; n# N- t
Japan; cDepartment of Biophysics, Graduate School of Science, Kyoto Univerysity, Kyoto 606-8502, Japan; and dCenter for iPS Cell Research and Application,& `; G0 I) |, F' K9 M
Kyoto University, Kyoto 606-8501, Japan
5 |, ^1 R  Y- Z- w* @Edited by Darwin J. Prockop, Texas A & M Health Science Center, Temple, TX, and approved May 4, 2011 (received for review January 19, 2011)" ?* ^! P* ^9 V9 w& d: |3 B% w
The stochastic and elite models have been proposed for the
# D3 }) l2 [4 Dmechanism of induced pluripotent stem (iPS) cell generation. In0 {3 Q7 E7 V/ N) {: S  M' D% |4 {% u0 k
this study we report a system that supports the elite model. We
/ Q- F) K; \8 s# W5 z6 i8 S. spreviously identified multilineage-differentiating stress-enduring5 {7 K/ y" S  ?& |
(Muse) cells in human dermal fibroblasts that are characterized
( p% A$ O$ t# |% ^. M$ Wby stress tolerance, expression of pluripotency markers, selfrenewal,9 s5 }2 J# ]* E
and the ability to differentiate into endodermal-, mesodermal-,
$ B# X, G5 n' c3 x. Yand ectodermal-lineage cells from a single cell. They can* X) g7 r0 Y% f, f/ V3 \/ A3 T
be isolated as stage-specific embryonic antigen-3/CD105 doublepositive& c. w# E2 v% a; [: U0 j0 G. C
cells. When human fibroblasts were separated into Muse' R& u/ s8 D* O! c0 e% q0 J) B2 C
and non-Muse cells and transduced with Oct3/4, Sox2, Klf4, and6 V1 |/ t% Z, h
c-Myc, iPS cells were generated exclusively from Muse cells but0 ~, Q: u) C# L" q; x+ Q! q
not from non-Muse cells. Although some colonies were formed4 T* X: E5 |  m  V8 H( L1 |
from non-Muse cells, they were unlike iPS cells. Furthermore, epigenetic& N% H, R, w' `# Z
alterations were not seen, and some of the major pluripotency
) P0 e. ?4 B$ G$ Qmarkers were not expressed for the entire period during
4 X) P# Y6 Q& E  ^iPS cell generation. These findings were confirmed further using4 v; X# q$ Y- N
cells transduced with a single polycistronic virus vector encoding
! j+ [7 ?( d0 \. t8 \- _$ i3 Oall four factors. The results demonstrate that in adult human fibroblasts
* S# r7 e3 O8 J8 Va subset of preexisting adult stem cells whose properties are
2 Q  v/ R3 n* C6 g) f# V9 ~4 psimilar in some respects to those of iPS cells selectively become iPS8 G: X. H9 N4 h1 W! w4 }5 }
cells, but the remaining cells make no contribution to the generation4 M+ e2 Z$ q9 c7 L7 c& ?
of iPS cells. Therefore this system seems to fit the elite model' q# `6 ]: |1 t# l, O
rather than the stochastic model.+ }' n+ l/ t# z/ l; y6 T

9 o' A6 }  k+ s% Q' E) w在原始Fibroblast中用特定Marker分离出一群细胞,只有该种细胞可以被诱导为iPS,基本可以回答你的问题吧,MEF中可见一斑
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发表于 2013-10-12 11:10 |只看该作者
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发表于 2013-10-14 15:43 |只看该作者
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% A3 Q% Z. l: W7 }* o/ \: p. [; G& A  _
: x: J0 x1 Z: M  i: A请问您确定是12.5天吗?我是做iPS的,每次都取13.5天的MEF,会不会有问题?
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