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[请教] 质粒扩增时,所用到的大肠杆菌培养基是购买的还是自行配制的啊?   [复制链接]

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包包
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楼主
发表于 2010-7-7 15:14 |只看该作者 |倒序浏览 |打印
干细胞之家微信公众号
O(∩_∩)O~近期我们实验室要扩增质粒,之前没有做过,兄弟姐妹们,谁知道需要买那些东西啊?所用的大肠杆菌LB液体和固体培养基是买的还是自己配制的啊?谢谢啊!
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沙发
发表于 2010-7-7 15:51 |只看该作者
我们都是自己配,效果不错!
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藤椅
发表于 2010-7-7 19:11 |只看该作者
一般都是自己配的吧。。。。我周围的没有卖现成LB的。。
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板凳
发表于 2010-7-7 19:14 |只看该作者
我的是自己配的,生物公司也有卖的,看自己决定了,着急的话一般用生物公司的。效果都差不多。
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报纸
发表于 2010-7-7 19:22 |只看该作者
怎么配备啊?教一招呗

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地板
发表于 2010-7-7 19:57 |只看该作者
一般都是自己配的,很简单。
: I6 V3 Y1 a6 w: s" s& iLB液体培养基配制方法:10g蛋白胨(Trytone),5g酵母浸出物(Yeast Extract),10g氯化钠,定容至1000ml,高压灭菌,4度保存备用就行了。根据载体的抗性基因添加一定量的抗生素,Amp一般的添加量是50-100ug/ml。
- _, x2 y1 z3 aLB固体培养基的配制方法:10g蛋白胨(Trytone),5g酵母浸出物(Yeast Extract),10g氯化钠,琼脂粉15g,定容至1000ml,高压灭菌,等温度降至50-60度时添加相应抗生素,然后倒板,封口袋装起来,置4度冰箱备用。Amp一般的添加量是50-100ug/ml。
8 m! y5 B& H! w& v6 s配制时可根据自己使用量的大小,按比例增减各种成分。
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7楼
发表于 2010-7-7 23:52 |只看该作者
这东西自己配了,高压就可以了。常用的菌种实验室一般都有保存吧
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8楼
发表于 2010-7-8 14:02 |只看该作者
一般自己配置然后高压灭菌就可以用了
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9楼
发表于 2010-7-15 10:26 |只看该作者
本帖最后由 cactus.X 于 2010-7-15 10:28 编辑 2 V2 V# \3 F0 ?3 B* \1 H( t

5 |) i4 K$ Q1 f! I: XLB培养基建议自己配,很容易,LB培养基放置太久的建议不用。我们实验室经常用,配方和五楼提供的一样:
) H, [- K! K" Y5 VLB液体培养基配制方法:10g蛋白胨(Trytone),5g酵母浸出物(Yeast Extract),10g氯化钠,定容至1000ml,高压灭菌,4度保存备用就行了。根据载体的抗性基因添加一定量的抗生素,Amp一般的添加量是50-100ug/ml9 O* s* o6 }% r* Z. c
LB固体培养基的配制方法:10g蛋白胨(Trytone),5g酵母浸出物(Yeast Extract),10g氯化钠,琼脂粉15g,定容至1000ml,高压灭菌,等温度降至50-60度时添加相应抗生素,然后倒板,封口袋装起来,置4度冰箱备用。Amp一般的添加量是50-100ug/ml。
1 K3 q$ ?' t6 {) ~# A7 I0 }不过我们一般把抗生素配成溶液,根据质量浓度通过单位转化配成一定物质的量浓度,然后以后按“1ul抗生素--1ml培养基”添加。这样比较方便!
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10楼
发表于 2010-7-28 23:14 |只看该作者
自己配啊,很便宜的。盐有高盐和低盐,根据实验情况选择。高压前调pH 7.0。
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