求助：MSC爬片后细胞形态改变了

arwen

由于本人要做细胞染色，用MSC制作细胞爬片，用于爬片的玻片用75%酒精浸泡过夜后PBS洗涤，没有其他处理（以前也曾泡酸泡碱+高温灭菌，但这样处理后的玻片上细胞死得很多，师兄师姐都是只用酒精泡，效果不错。买了多聚赖氨酸打算做神经分化的时候用，但老板说MSC贴壁很牢，没必要现在就进行包被）。我现在细胞基本能贴壁，死得也不多，但细胞本来应该是呈成纤维细胞状的，爬片后细胞形态圆了很多，跟直接种在板上的细胞不同，那形态是椭圆的。请问这正常吗？我过几天要做神经分化，细胞爬片会不会也看不出已分化细胞的形态呀？求高人答疑……

小熊不杀生

我也是培养BMSC，玻片使用酒精泡过就行，不用泡酸，你现在的细胞开始用诱导培养基了么？我爬片之后的细胞生长不均匀，形态拉得较长，可能是老化导致，不清楚你用第几代诱导的，我也是最近才总结出来的，如果要染色不需等到文献中说的特定日期，因为每个人的细胞生长情况不一致，拖得越长，可能导致细胞凋亡的越快

arwen

我现在只是试着爬一下片，还没用诱导培养基。用的P6代。应该不是细胞代数的问题，因为我看到在板上的同代细胞跟玻片上细胞的形态是不大一样

deron

椭圆形？是否一点棱角都没有？可能是玻片的问题，我们平时用的培养瓶和孔板的底面都是经过特别修饰的。

zx19851985

我用的无水乙醇泡20min,在传递窗中 75%酒精泡着照半小时紫外，拿到细胞室中取出盖玻片，放六孔板中爬片，期间观察细胞长的还蛮不错，MSC呈长梭形，只是在做免疫细胞化学后再观察细胞就变圆了，估计与后期加的试剂有关