求助小鼠骨髓BFU-E的识别

luozhen1018

上传的图片为40倍或100倍下的视野，想请教下这些图片的集落是否为BFU-E？如果是，是不是典型的BFU-E?还有一个问题是，CFU-E该如何判断，能否发几张典型的CFU-E的图片？谢谢！

chendongbo338

都不是BFU-E,BFU-E集落通常比较大，致密并含有色素（红色或褐色），一般由200多个细胞组成，你的有可能是GM

biohu82

都不是BFU-E
6 T8 g9 R1 ]1 ^( I. o* K) zBFU-E和CFU-E的形态区别主要在于每个colony中细胞数量的多少，BFU-E很多细胞，CFU-E细胞数较少

montalexiong

可以用联苯胺染色，在白色背景下观察

montalexiong

请问你们做小鼠ｃｆｕ－ｅ的配方是什么，我用如下配方：
# Y/ o& X. k8 s  G: q8×105 BMC悬于100ul DMEM培养基，加入3.9 ml 培养基（含0.8%甲基纤维素，10-4M β-巯基乙醇，2mM L-谷氨酰胺，15% FBS, 1% BSA, 10 ug/ml Insulin,200ug/ml人转铁蛋白， 3 U/ml rhEPO），将此1ml混合液（含2×105 BM）种于35mm的培养皿（每组3个复孔），培养，培养第3天 ,（用联苯胺染色后？）在倒置显微镜下计数 ,含8个以上染色阳性细胞的集落为1个CFU-E。5 O2 B, ]+ P6 j  n3 \1 H0 s7 G9 Y' w
参考了各方的资料，在自己配的体系中，长的并不是太好，而且甲基纤维素不能充分溶胀开来，造成视野比较脏

montalexiong

回复 2# chendongbo338
+ k1 X6 O5 I* V* B) l' p0 r: d5 t/ J; f: z! j4 S$ n

0 P5 f: ]( m% R2 b* |    请问你们做小鼠ｃｆｕ－ｅ的配方是什么，我用如下配方：
  W8 x& h) W4 f/ M( z7 q8×105 BMC悬于100ul DMEM培养基，加入3.9 ml 培养基（含0.8%甲基纤维素，10-4M β-巯基乙醇，2mM L-谷氨酰胺，15% FBS, 1% BSA, 10 ug/ml Insulin,200ug/ml人转铁蛋白， 3 U/ml rhEPO），将此1ml混合液（含2×105 BM）种于35mm的培养皿（每组3个复孔），培养，培养第3天 ,（用联苯胺染色后？）在倒置显微镜下计数 ,含8个以上染色阳性细胞的集落为1个CFU-E。/ F3 u. k1 x8 X: c$ f8 ^/ P
参考了各方的资料，在自己配的体系中，长的并不是太好，而且甲基纤维素不能充分溶胀开来，造成视野比较脏 8 j  I- q; b) C8 k

! |7 G, b7 `) C本文来自干细胞之家  - 中国干细胞研究员的交流论坛，http://www.stemcell8.cn，详情请看：http://www.stemcell8.cn/viewthre ... mp;extra=#pid188691

luozhen1018

我们买的是stem cell technologies公司的红系的体系，M3334