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本帖最后由 瑟瑟狼 于 2010-10-2 09:59 编辑 % H' r2 d$ N4 I: {* m9 I* K X
7 T) X" S4 X! `: a* q# O- b/ u这个叫灌注固定,也就是在动物活体时将4%多聚甲醛固定液灌流到全身。。。2 k$ A% J4 x9 R: `5 Y
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灌流针从左心间插入,一般深度到达左动脉弓为宜,此时隐约能明显看到针尖在动脉弓的位置,为了方便固定,可以用小号止血钳夹住进针位置,打开灌流器(蠕动泵之类),调节流速(这个值一般靠经验),开始灌注 M& l* \/ G0 S8 c, h7 P; S: M J
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待小鼠快变成很“气球小鼠”之前,其实很快,也就打开灌流器之后三十秒不到,可以观察灌流器工作阻力明显增加,剪刀剪开右心包,让灌流液流出6 F. k$ i3 f+ ` _: V: O
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期间会观察到的现像,四肢抽搐,鼠尾先翘起后僵直,肝脏颜色变浅,鼠口鼻中有白色泡沫涌出,肠道颜色稍有变化,但不是很明显,要仔细观察* l2 K( f, R s' \# ^ l9 f% ]
8 Q: Z" |: P0 u0 d& [1 b判断灌注效果好不好的标志是
& m8 q) s, V; h6 V鼠尾僵直;肝脏变成浅色,有的人直接描述为发白; F; D/ B$ l3 u) H! D( B1 ?
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决定灌注质量的额外因素: S/ A- M+ R( |3 i2 n9 c* u
小鼠麻醉剂量要合适,不能让它麻醉过量;剪开胸腔前做好关注准备,剪开之后立即操作
3 v. u |$ [$ k( V中心原则:一定要在灌流液进入之前,保证老鼠存活,血液循环畅通! j! L) T' Z1 ~2 v3 W) o
) j& x4 v% ?. ~ v我很水,希望各位牛人批评指正
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, D4 g. e+ e% m: R如果要保留完好心脏,则可以绕过左心尖,直接从主动脉弓进针,可以直接将主动脉弓截断,伤口进针,下口止血钳封闭,灌注差不多时,就不用剪开右心包,直接打开下口 |
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