请教一个关于病毒的问题

snokey

1。一直用-80度冻存的Retrovirus诱导iPS，没有用过冻存的lentivirus，不知道lentivirus效果会不会更好些？4 N( h! i1 }2 @3 o/ N) D: ^3 T
2。冻存的病毒肯定不如新鲜的，但是我没有做过比较，不知道到底会有多大差别？
. b% f5 v% ]1 y/ F2 x* t5 N3。我现在每次使用的是没有浓缩的病毒上清，病毒感染两次，第一次感染3天后做QPCR测到total Oct4 mRNA的表达量（内源+外源）是未感染Oct4组的220倍左右，不知道这个倍数算不算低？

大刀无敌

1冻存的病毒也可以诱导，但是效率很低，建议用新鲜的做。
5 ?/ `6 H, C1 A4 x) A" m3 m8 A2有一个问题不明白，没有感染的mef怎么会表达oct4，所以对你说的220倍我没有一个直观的认识到底是多少，还有诱导第3天是检测不到内源oct表达的。

snokey

谢谢楼上的。8 p6 y8 Z% Q# b- H
不好意思，第一个帖子没有说清楚，我用的是人的脂肪干细胞(HADSC)来诱导iPS，脂肪干细胞又内源的Oct4表达，比普通的fibroblast高。我说的220倍就是 Oct4感染后的HADSC中Oct4 mRNA/未感染的HADSC细胞中mRNA

cicadacjk

retrovirus是有包膜的病毒，冻融会损失90%以上的活性" X0 w3 e9 i: F2 v& ^( Y" {
建议四度或室温保存，三天内用完。* W$ o2 ~/ L' w4 r) I/ W

. d" r  ^4 u9 a- K' [3 Slentivirus超速离心后可以稳定保存在-80度