为什么小鼠骨髓间充质成骨诱导后有很多细胞死掉了？？

sara

如题，本人正在做小鼠骨髓间充质成骨诱导，加了成骨诱导培养基之后有一些细胞像是脱壁掉下来了，半浮着，是死了吗？这正常吗？用的培养基是我们实验室已经用过很多次的，只要是成骨诱导我们都是怎么做的，应该没有问题。我在想是不是我的细胞密度小了点啊，因为对照的长得挺满的细胞就没咋地。本人新手，望高人指点。" `8 h" l: C( L) h$ n' ]$ b
谢谢大家！

luoziwei

你确定药品有没有过期？

sara

不确定，但是应该没过期吧，之前一直用的。

luoziwei

同一批实验，同样的medium，对照组没问题，我想就是实验组的药品或者配方有问题了，一般来说细胞密度（针对同时消化种下的细胞）对成骨分化影响不大，你再仔细重复做一遍看看。

ivantanqi

这个很正常，新手经常会碰到，6 e8 K& A. w  W0 B3 n+ K) m: J
首先最大的原因可能是你操作换液时，碰到了细胞，破坏了细胞贴壁。
- G2 z0 j! |/ n" N0 d+ E, G4 H还有个原因是你的细胞本身老化比较厉害。

gxbzj吉祥草

密度也有影响，我听老师说的，因为细胞间的传导信号变弱，应该适当密些~~

色色兔

我的细胞诱导了不减少啊，反而还持续增长啊

lvmaoshiwo

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' r, f& s; V" B6 J- x) u对照组还跟诱导的时间一样培养吗？ 用的什么培养基，要不要传代，不要传代的话细胞增值过了就会死掉吧？

luoziwei

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平行实验当然要相同的培养条件了。DMEM低糖，无需传代，把握好细胞密度，不要太密了