关于细胞冻存的一个问题，不知大家平时有没有留心过？标题留长一些，欢迎大家热烈讨论

deron

本以为这个意外就这么结束了，前一阵子把这个结果做了一个简单的PPT，有人看了之后提出了质疑，他说缺一个对照试验。仔细检查发现的确，自打接触细胞以来接受的很多都是上级老师的经验，自己新做的东西比较少。
% w3 G1 s0 a8 T两周前进行了一次复苏的台盼蓝染色，发现拒染率在80%之上，甚至我们的主管老师提到成功的冻存复苏率应在90%之上。  W0 s! y+ \+ |* D* ^1 ^
万恶的对照，万恶的惰性……
- W. Q6 w+ |3 R2 ~好吧，如果再有机会，我会补上实验。如果大家有知晓的，请帮我在下面补上结果。

呼吸

dmso毒性很大，4度过夜很危险的，正常应该-80度异丙醇过夜 或者用程序降温仪。

deron

回复 呼吸 的帖子
1 l/ E- S- O  ?' X' Q% ?( H3 I. o/ \2 c& |3 f0 g" U
异丙醇过夜？是指用异丙醇做冷冻保护剂吗？步骤是什么啊

vae有何不可

如果活性不高的话 基本是DMSO对细胞的毒害造成的，但是DMSO在整个体系中的比例少于10%时，其对细胞的毒害会减少很多的。。

crystal

我上次冻存的时候，因为下午自己墨迹担误的时间，后来只在-4度冰箱里放了半小时就到5：30，那老师因为忙着要走，所以直接就给我放进液氮里，并且告诉我他一直都是这样做的！不知道他是不是在安慰我！

chuanbaozang

怀疑你的这种冻存的效果，期待你的切身实验结果

lunyuyuanxj

我也刚做了一次这样的事，但在4度放置的时间要短些，最后的结果90%以上的细胞都死了

sun_happone

可能每种细胞不一样，不能一概而论吧，稍微顽强一点的细胞或许还能存活久一点，脆弱一点的放在4度冰箱这么长时间当然要死掉了。