关于小鼠ES细胞无饲养层细胞的培养问题-怎么驯化

上海过客

关于小鼠ES细胞无饲养层细胞的培养问题-怎么驯化
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' x6 N4 O  K/ q3 g3 n有做过的吗 ？  我正在做 。期望使细胞从 饲养层过渡到无饲养层 培养 。

zhbshi998

期待高手回答

痞子的烟头

可以的，在三维上培养

quit6927

做过hESCs，我们用的mTeSR1(StemCell Tech.)的培养基，培养皿用Metrigel coating。如果不好的话，可以先用一半的MEF conditioned medium+一半mTeSR1，换液的时候在全部用mTeSR。

上海过客

似乎用 条件培养基 ，细胞直接种到培养板上 的形态也远不如 用 MEF 来养的 。9 U# L$ u( B7 @8 V9 [  h# G" h
6 M9 L- A. }6 L0 M/ C% u# W9 Z
具体的原因大家有了解的吗？

crystal20101026

我用的是无血清培养基，neurobasal+B27+bFGF+EGF，细胞生长状态还可以。

sun_happone

MEF的作用之一是让hesc保持未分化状态，如果不用这个，那要怎么保持未分化呢？

dilal

小鼠ESC可以不需要饲养层培养，只需要在培养过程加入抑制细胞分化的细胞因子LIF即可。: X' ~" d2 H* f3 r8 C
现在hESC饲养层及无饲养层培养技术都已经很成熟了，你可以在相关的细胞试验指南中查询到。

bigsnow55

dilal 发表于 2010-11-7 23:58
8 H7 }- O; {# Z9 b9 F小鼠ESC可以不需要饲养层培养，只需要在培养过程加入抑制细胞分化的细胞因子LIF即可。3 Z" s+ O3 m1 [! |# V
现在hESC饲养层及无 ...

( f: R; B. Q3 K2 r7 E5 _6 O
小鼠ES的培养，即使有饲养层，也需要加LIF。9 F4 m0 t/ O: q, M6 E1 K. I6 F
人ES无饲养层的培养技术，也没你说的那么成熟，不同公司，提供的方法和试剂都不尽相同。