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楼主: vet2008
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羊膜上皮细胞原代培养   [复制链接]

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11楼
发表于 2011-4-22 17:36 |只看该作者
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回复 清影 的帖子
  q9 ~6 `3 S# q) X6 L: [' |
) d% ?7 D3 e1 G5 D6 @7 N你们做得贴壁很好吗?AEC本身就有三种状态,飘浮/贴壁/伸展的;细胞收率很低,怀疑胰酶是不是过期了,呵呵
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12楼
发表于 2011-4-22 17:39 |只看该作者
回复 一转身的距离 的帖子9 V5 z" u9 }# [* P' i. f
0 U8 l6 f  E2 O6 X8 ~$ ^
咱们的想法是一样的,清洗是很重要,尤其遇到血丝多的时候,基本就会失败的;尽快处理,时间越短越好;我们一般是只用胰酶消化半小时/次,但是原代的成功率还是比较低,你的呢?是什么个状况?
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13楼
发表于 2011-4-22 17:53 |只看该作者
回复 gaorongbest 的帖子1 B, z9 n" _2 s2 R  P
1 I& g" O* E* @: R# I. l; |" P7 Q
我们也用胰酶,时间很短;羊膜清洗是很重要,我们也在摸索,原代分离出来后,培养体系也很重要。你们用什么消毒剂哈……
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14楼
发表于 2011-4-22 18:08 |只看该作者
回复 gaorongbest 的帖子3 q, J+ _5 E  B) ]6 }6 O/ B

1 Z, G8 E  L# I- c! ?1 a" ]呵呵,咱们说的不是一类细胞!我们在做AMMSC^_^

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15楼
发表于 2011-4-24 18:11 |只看该作者
回复 清影 的帖子5 c! t% M1 r5 ?- J' M: A

" u; H" _" P% s0 v" i6 d( k: x我们不消毒啊,手术室就是无菌的啊

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16楼
发表于 2011-4-25 08:54 |只看该作者
回复 gaorongbest 的帖子( T' X3 D: p9 q6 Z, p4 N4 }7 H& ~
5 g/ m- m$ X# q. w5 B* A' A: D& G
嘻嘻,那原代细胞分离后没有出现过污染的情况吗?运输液菌检合格么?9 m) n& P' Q+ ^. P
我们有过痛彻的经历啊

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17楼
发表于 2011-4-25 10:07 |只看该作者
上皮细胞也有悬浮生长的吗?我一直以为只是贴壁生长的,学习了~!
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18楼
发表于 2011-4-26 08:47 |只看该作者
回复 清影 的帖子$ x9 E2 {2 j2 W2 J% ?

% Y1 \+ m+ o- t0 V/ y* n* Y/ V! H没有污染过,你们试着在运输液中加双抗,试试吧!
+ R; g2 k9 v3 _) g
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19楼
发表于 2011-4-26 14:08 |只看该作者
回复 清影 的帖子
* S3 F1 K# z9 L; T: r& N0 U5 K+ U8 ~% _; |6 e$ m0 H$ P7 G# W
胰酶的话用0.25%,一般而言,是不加双抗的。做AEC一般是胰酶就行。但是时间的控制方面你们还得摸索
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20楼
发表于 2011-4-27 10:38 |只看该作者
回复 清影 的帖子. d+ }6 ?5 j- w. L0 N$ D: D/ {5 O

7 Q: L7 j" u# b4 N+ z我也有试过分离hAMSC,不知道你是用的什么方法?
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