如何提高转染率？

zb_ming

大家都知道，转染问题一直是影响细胞克隆的一个关键问题，大家有什么高见？洗耳恭听。

ybshan1985

应该看你用什么方法转染什么细胞了吧

zuming

转染效率和被转颗粒性质、细胞种类还有转染方法都有密切关系。
' q5 D2 T' l5 f4 N' w: k我一般用的多的是电转染，延长电转染持续时间和频率而不加大电压有利于电转染;电压高了对细胞伤害还是很大的。最好选用处于G2/M期的细胞进行电转染。
- u( N3 k4 A& _有文章说孵育温度影响基因的转染效率;电转染前后低渗条件有利于电转染。这方面我就没试过了。你可以试试。
/ ~. R9 [/ k8 y: F脂质体转染用过Lipofectin 2000，其效率也是因细胞而异的。

zb_ming

电转染还是比较新颖的，我也用过，好像转染率也挺低，你的建议不错，值得试试。

crystal

我也要做转染，但是不知道到时候就是稳定转染好还是瞬时转染好，因为瞬时转染的话蛋白表达只有几天，稳定转染时间长，但是也不太好做，正大犹豫中！我也是用的脂质体2000.

crystal

只有确定课题需要持续做下去，非稳定转染不行的时候用稳定转染,为什么呢，技术上两者都可以，而且稳定转染的转染效率更有可比性.但是从消耗的精力和时间上，前者要合适的多.稳定转染最少要两三个月，长则半年一年，而且不一定能得到稳定表达的细胞株，这是关键.

siyue13

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6 o( K/ @8 ]8 E脂质体不好转染的可以试试罗氏的fugene，谁用谁知道; f) L8 `" `7 W