原代细胞培养条件对细胞的影响 ，难以捉摸

gaorongbest

最近我们对原代细胞培养条件进行摸索，原以为胰酶和PBS有问题，因为 PBS是买的那种粉剂直接溶解的那种 ，所以一直不知道里面含有钙钾离子，最近有人做实验才知道里面有 钙钾离子，所以以为这影响了消化效果，所以原代做的不好，但是周三做的那批却长的挺好 （用的是含钙镁离子的PBS及胰酶 ），所以现在很纳闷，到底是什么因素影响的原代啊？请大家帮帮忙，看看到底是什么问题！

shiqingxi

PBS应该跟分离原代没有关系吧

gaorongbest

回复 shiqingxi 的帖子
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$ ^" _2 }2 ?0 M- M5 v: o$ k由于钙镁离子会影响胰酶的消化能力，所以在原代消化时可能 消化的细胞数量很少，加上细胞的密度依赖性，原代就可能长不好，所以还是有影响的，但是最重要的影响就不知道是什么了，所以有点质疑。

痞子的烟头

这个影响不是很大，影响原代培养因素，比如你取的原始细胞最好是新生体的，其次分离后注意胰酶消化时间，太过会破坏细胞表面受体等，最后培养基血清等

李玉桃

影响原代培养的因素很多，PBS最好是根据参考文献上的配方自己去配制吧，

daviddow

消化不会影响元代培养。主要是培养基影响元代培养。

daviehe

为什么不用无钙镁的PBS呢

luomx07

不太懂，不过还是顶下

gaorongbest

回复 痞子的烟头 的帖子2 x! x3 {; \) h9 I3 _
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我们很多次都是细胞贴壁不伸展，不知道是不是消化时间过了，血清不知道有没有问题，一直用的是四季青的。你能不能给我分析一下不伸展的原因呢？这个让我感到很困扰，谢谢啦。

gaorongbest

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不是不用，而是买的那种包装的PBS 没标注无钙镁离子，最后才发现这个问题的，原来一直以为养细胞用，不会购买含钙镁离子的呢。