小鼠骨髓MSC流式

feiyang

请教大家，我的小鼠骨髓MSC貌似长的还不错，但是流式做下来，CD34、45都有95％左右阴性，但是CD105的阳性率只有65％。是不是就不能说这些细胞是MSC啊？非常郁闷。

cell1314

对于MSC的鉴定，因为不如HSC一样有比较特异性的标志，目前主要是通过组化及流式鉴定，FCM是通过组合标志，除了造血系的标志CD34、CD45阴性外，阳性的有CD29、CD73、CD90、CD166、SH-2、SH-3等等，CD105只是其中的一个，尽管只有65%左右，还要看其他CD分子的阳性比率才能综合判断你的MSC纯与不纯。

cell1314

对于MSC的鉴定，因为不如HSC一样有比较特异性的标志，目前主要是通过组化及流式鉴定，FCM是通过组合标志，除了造血系的标志CD34、CD45阴性外，阳性的有CD29、CD73、CD90、CD166、SH-2、SH-3等等，CD105只是其中的一个，尽管只有65%左右，还要看其他CD分子的阳性比率才能综合判断你的MSC纯与不纯。

cell1314

不过感觉最重要的还是你的MSC诱导分化谱系分化能力，毕竟对于“干细胞”的定义来说，多向分化潜能是其核心内容之一。

luluegret

回复 cell1314 的帖子4 ]* i& n% s, _, B$ j. h

! M* q  D/ m* f( l5 T/ E同意cell1314 的建议
3 Q5 r! g# h5 ^! F/ L流式鉴定仅仅是一方面
; B) |2 Z2 S8 z; _$ ^. {: X) F; v% H更重要的是细胞向其他方向分化的能力

yushi1105

cell1314 的建议很好 同时补充一下 你的细胞来自骨髓 又是小鼠的细胞 可以考虑阳性的cd包括sca1 因为到目前为止 还没有更好的cd marker证明哪一个marker阳性就一定是什么细胞 所以没有必要盯着cd(surface marker)不放的 祝顺利

feiyang

谢谢大家呢！感动！但是发文章时，需要有流式图啊，那样半阴半阳的不行吧？

iceyang

65%的阳性率已经很不错了，再做2批，看看表达的情况，取均值。

nydfy

小鼠骨髓MSC本来就不是一个纯的细胞系，有很多的亚群构成，而且目前也没有金标准定义MSC，所以这样的结果是正常的！

肉肉77

麻烦问下楼主，最后你的细胞怎么样了？我做流式鉴定，用了CD11b，CD34，CD45（阴性）；CD44，CD73，CD90，CD105，Sca-I（阳性），但是有三个marker完全不正常：CD34只有很少部分阴性；CD90几乎全为阴性；CD105完全阴性（这个很奇怪，我用全骨髓细胞看的时候，CD105也显示全为阴性，所以我不确定是不是抗体有问题）。还有Sca-I，差不多4、50%的样子阳性，这样的话这群细胞还可以要吗？还有没有必要诱导分化？
" Z# I0 _; n, V: e9 ^实在是养的很不容易，烦请指教，谢谢!