pri-miRNA的超表达能用pEGFP-C1吗？

runsong

回复 深海寂寞鱼 的帖子
2 _8 i1 k7 B0 R' V" R' E8 _" I: h% x: ^
谢谢你从前的指点，一个多月前我按照你的方法把载体建好了，定量PCR显示34c上调了9倍（以5s为内参，34c与5s的Delta Ct由9.9上调为6.7），现在正在进一步探求34c诱导的效应。7 `" b6 u# Z% W
不知你们照此法得到的结果如何。
0 e7 I3 k# a' r% B) @

深海寂寞鱼

回复 runsong 的帖子
* V1 I3 r8 Y# T5 }. r% k8 K/ E( R: q5 m$ C7 d
恭喜你啊。
! e# _  C6 U* c# q不知道你是做的顺转还是稳转？
3 K$ O5 R. \( y1 F我们通常都是做的稳转。不同克隆间的表达水平略有差异。# d" E/ u: r' A9 o6 Z
一般都是几倍到十几倍。2 `# _8 D$ u6 S! s
所以好像和你的结果差不多。

sannia

回复 runsong 的帖子, D, O. u$ ?- x& h. C
2 z4 r" {3 N& f; f) @. ?5 y0 G. G
你好，我最近也要做这方面的载体。8 c4 f9 x$ Y5 {; |, D
不知道楼主能不能共享一下质粒的序列，我看看GFP与primiRNA的之间连接序列

runsong

回复 深海寂寞鱼 的帖子
: ^& v& j2 R0 Q9 N
; J) @0 `5 C/ p8 T, |我做的是瞬转，转染效率约为60%，转染后3天收样。你们那里还有做稳转的吗。

runsong

回复 sannia 的帖子9 O9 W8 u" |) B( Y) x
2 q+ [: k% q* a* Z) q% ]: s
我是按照深海寂寞鱼的方法做的，附件里有全部资料，不清楚的话再联系我。

runsong

附件

sannia

感谢之至！

runsong

我的课题是：miRNA在雄性生殖细胞分化和发育中的作用
9 P  F" }, Q* m  x% ?以后多交流

runsong

我的课题是：miRNA在雄性生殖细胞分化和发育中的作用6 D0 K7 X% v! ^* A9 F+ K
以后多交流

runsong

我的课题是：miRNA在雄性生殖细胞分化和发育中的作用
; r; V- B9 I( @4 m以后多交流