帮忙看看C6细胞怎么了

静水流深

正常生长的肿瘤细胞 传代几次之后 开始出现小黑点起初以为是 细胞碎片 可是却越来越多 不知道什么原因 请高手帮忙

静水流深

起初只是少数的小黑点 可是越来越多 大部分还在细胞表面和周围 每天换液PBS冲洗 只能减轻不能消除 难道是黑胶虫吗  细胞培养液会有微微的浑浊 不明显 这到底是怎么回事呢

静水流深

btyou8u

　这个我也遇到过，培养基不像细菌污染混浊，但细胞状态越来越差，很容易挂掉，是酵母菌或者其他真菌污染，建议重新复苏一支，实在不行的话，消化下来，大量培养基重悬，低速离心（只离下状态较好的细胞），如４００ｒｐｍ，５分钟，ＰＢＳ再重悬，再低速离心，也就是想办法留下状态好的单个细胞，尽量除去所有其他的东西，然后铺板再养，如果这种细胞增殖能力比较强，建议接种密度比平时低一些，状态不好了，就勤换液，细胞长起来后就会发现好很多，如果觉得不理想，下次传代时继续上述步骤。这个绝对是本人在多次实践中得出的经验，流式分选下来的细胞非常容易这样，培养环境，个人操作不严格也容易这样，非常麻烦。如果上述无效，那就只能重新复苏细胞或者再买了。

静水流深

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会不会与细胞本身有关系呢 细胞老化 衰老 什么的

btyou8u

回复 静水流深 的帖子3 ?4 ^' X5 e* J9 f1 h
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细胞培养太久，老化后会发生一些形态上的变化，且活力降低，光镜下不再那么亮，但你自己说细胞才传了几代，一般的肿瘤系细胞在10代内应该不会出现这种状况，你的图很明显的说明了问题，那不仅仅是细胞碎片...........一定要把细胞养好再做后面的实验哦，要不然就只能是浮云了........