DC 如何收获

woosheng

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4 U/ |! b0 |: U- y1 B' G" Q/ M) A' J+ \! U! Q
认同

jxaf3900824

俺一直用的细胞刮

朱砂泪

细胞刮刀刮的话的确会对细胞有一定损伤。

wagumaxida

hhchen418 发表于 2011-1-11 17:14
4 V( E! ?8 o1 ~7 q) C* z请问大家一个问题：树突状细胞培养7天后要收获，该采取哪种方法？是直接用PBS冲洗下来还是用胰酶消化后洗涤 ...

/ l' b/ U% o" G4 c在第七天只要刺激成熟充分，很容易就吹下来了，甚至晃一晃瓶子就下来了，因为成熟DCs会成团脱离贴壁

jack063@163.com

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4 @( ~9 @! f+ T' Q- ?9 h+ H$ |" w: `! {& Q/ R1 j; A
损伤肯定会有。在细胞吹打不下来的情况我才使用。楼下有个说得很具体了，他的方法还洗吹不下来就上刀吧，一定要清点哦

我是丁香

求促DC成熟的方法。

lyj-0017

首先可以肯定的是不能用胰酶消化，有文献称胰酶对DC细胞表面抗原有剪切作用，所以排除掉胰酶；用刮刀肯定也对细胞用损伤，如果要应用到临床的话，该方法个人认为不可取；通过温差的方法使细胞脱落也试过，效果也并不理想；至于有同学说仅仅用生理盐水冲洗，我个人持怀疑态度。后来使用一种比较温和的消化液（Solution C），消化效果也并不理想，加消化液于37度温箱15分钟后，移液器反复吹打细胞（6孔板内），最后仍有一小部分细胞下不来。DC细胞的收获并不是一个小问题，处理不好的话，虽然能收集部分细胞，但是真正应用的话可能效果并不会那么好，所以还是应该寻找更温和的方法来收获细胞，这个问题大家还是多讨论讨论，多想想办法吧。

透明之蓝

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回复 hhchen418 的帖子4 V4 U; P4 n( s: b

# m- ?& H. P, E. X1.不用消化
" n; S0 p: @( o2.细胞刮刀刮下来的，多数不是DC
2 L3 O( U# `1 J- L3.DC属于半贴壁，培养出来的也是成团的，直接吹打就可以