讨论皮肤成纤维细胞原代培养

luyoutian

   本人上周二取了自己胳膊上的细胞进行皮肤成纤维细胞的建系，一周过去了，贴壁率只有10%左右，我用的是M106的培养基，请问大家的意见，这样的生长效率能在本月30号前冻存吗？还有，以给位的经验，原代培养一般需要多久才能冻存？

zheng19791221

佩服。

tangyvhuang

luyoutian 发表于 2011-1-25 09:58 : G* x8 S% h0 ]4 j2 Z
本人上周二取了自己胳膊上的细胞进行皮肤成纤维细胞的建系，一周过去了，贴壁率只有10%左右，我用的是M1 ...

- f, ~) ]# L6 {- S3 P, E- D" [楼主这强悍呢，我们以前做表皮的时候用的贴壁法，不知道楼主是什么方法？酶消？贴壁？通常要看组织块的大小了，先用60mm的培养皿这样细胞克隆比较容易富集，扩增比较快。我以前用的是DMEM挺快的，原代一般是两个星期就可以冻存了，换一次液看看吧，估计楼主的状况30号冻存有点少

luyoutian

回复 tangyvhuang 的帖子9 u& w4 V0 P/ W$ H6 Q/ D" r
- ]# T. Z4 y  c3 i1 v9 K- k7 W5 Z, @
我用的是35mm的皿培养的，贴壁法，酶消化法，生长的确实有点慢，准备加点生长因子下去看看

ayeqiu

强人吖！应该要传个几代才能冻存。

goldensnail

迟看到,想和楼主交流一下.<皮肤成纤维细胞>

baiyunrui

细胞数够就可以冻啊！加生长因子后就是疯长！只是是否对其有其他影响尚不确定，和所加的量相关性较大！组织块法一般两周左右开始有细胞爬出，酶消化法要快很多，长满25mm的培养瓶估计最晚一周长满。所用培养基为L-DMEM