讨论皮肤成纤维细胞原代培养

luyoutian

   本人上周二取了自己胳膊上的细胞进行皮肤成纤维细胞的建系，一周过去了，贴壁率只有10%左右，我用的是M106的培养基，请问大家的意见，这样的生长效率能在本月30号前冻存吗？还有，以给位的经验，原代培养一般需要多久才能冻存？

zheng19791221

佩服。

tangyvhuang

luyoutian 发表于 2011-1-25 09:58 - t5 U( I5 c3 I% w! |- P, U
本人上周二取了自己胳膊上的细胞进行皮肤成纤维细胞的建系，一周过去了，贴壁率只有10%左右，我用的是M1 ...

( b, i8 |/ `. z* Z% g$ _楼主这强悍呢，我们以前做表皮的时候用的贴壁法，不知道楼主是什么方法？酶消？贴壁？通常要看组织块的大小了，先用60mm的培养皿这样细胞克隆比较容易富集，扩增比较快。我以前用的是DMEM挺快的，原代一般是两个星期就可以冻存了，换一次液看看吧，估计楼主的状况30号冻存有点少

luyoutian

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8 ^6 }" K+ P9 }& c/ D我用的是35mm的皿培养的，贴壁法，酶消化法，生长的确实有点慢，准备加点生长因子下去看看

ayeqiu

强人吖！应该要传个几代才能冻存。

goldensnail

迟看到,想和楼主交流一下.<皮肤成纤维细胞>

baiyunrui

细胞数够就可以冻啊！加生长因子后就是疯长！只是是否对其有其他影响尚不确定，和所加的量相关性较大！组织块法一般两周左右开始有细胞爬出，酶消化法要快很多，长满25mm的培养瓶估计最晚一周长满。所用培养基为L-DMEM