请教关于：无血清悬浮培养，EGF,bFGF,B27

cookiezhang

1、无血清悬浮培养人的细胞系肿瘤细胞，要用到EGF,bFGF.看文献大部分都用的Peprotech公司的，有重组小鼠EGF，重组人(animal free)EGF，重组大鼠EGF,还有重组人，小鼠，大鼠HB-EGF。这几种区别很大吗？做人的肿瘤细胞是应该用重组人EGF吗？在下新手比较困惑。
, v: U& Q8 j$ H  H4 ^2 p0 t4 ^2、如果买一只100ug的，用量是20ug／ml,大家用培养基怎么分装的啊，培养基中要加胎牛血清吗？$ |* j6 }' U) V7 l+ O4 ^; G' ^# f
3、有些人还要用到B27，并不都是神经细胞，这个的作用是什么啊？大家都用吗？* r  L# C% Q' n& T1 V

cookiezhang

bFGF就是recombinant human FGF-basic吗？还分人的，大鼠，小鼠的吗？好心人指点指点我这个菜鸟吧，在这先谢谢各位师兄，师姐了

ljzmy82

当然是用人的，最起码种源相同

一枝独秀

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7 e" [$ o. W7 Z" T, |: ^# t
# I* r9 k" s5 {; b' u% G2 v! f我3个都用了，不要加胎牛血清，浓缩100倍分装

fish_zbw1985

1:养人的细胞，最好用人的重组细胞因子，因为同源性最好；  i7 Z8 q6 z3 f) L" t
2：细胞因子可以用培养基或PBS稀释，但对于少数细胞因子而言需要酸性或碱性的保存环境，因此一切按说明书上的稀释方法为准，为了长期保存可在稀释液中添加0.1%-1%BSA做蛋白保护
* O4 a: R: \& @  C6 s3：B27是一种配方受专利保护的无血清培养添加物，代替血清功能，Invitrogen公司出品，适用范围不仅限于神经细胞，可在其网站查找其适用类型

cookiezhang

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) I. @, U3 ^+ \/ i% O% u3 Z: f8 h2 }0 \$ h% d; c$ W1 H  N% A
一般文献中提到的培养基都是在DMEM/F12中添加细胞因子,是不是无血清培养都用的DMEM/F12,还是在细胞原来所用的培养基如：1640或DMEM等里面添加细胞因子啊？

fish_zbw1985

+ K' F* [/ h+ F/ a* O

( C6 C8 r, y2 s, \4 U3 K/ l" @回复 cookiezhang 的帖子
  n2 u& m! C5 [0 U. e) B2 p. l( N2 S$ Y  A; _. W2 x
无血清培养基的基础培养基当然是取决于你所养细胞的类型和使用目的而定了。比如ES就比较适合在DF12中养，做诱导分化的时候有DMEM、IMDM、1640、MEM-α等基础培养基，每种培养基的使用目的都不一样。因为不同培养基的组分差异比较大，如果这个细胞刚好对这个组分敏感的话就需要注意了。当然个人认为由于因子稀释的时候稀释比例特别大，基本都是1000倍以上的稀释，所以貌似用什么培养基去溶对最后的培养体系影响并不大，甚至PBS都是可以考虑的溶剂。

WAX

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* {3 ?  J. I" I, G- \; T. r
你理解有点偏差，楼主是问在无血清悬浮培养的时候是用文献中大都采用的DMEM/F12培养基，还是和细胞贴壁培养时的培养基一致，如1640或DMEM。

cxscxs

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你好，最近我也打算买细胞因子。请问你最后用了哪几种细胞因子？效果怎么样？

cxscxs

回复 一枝独秀 的帖子  I3 E0 b) @& D2 S* s
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你好，最近我也打算买细胞因子。请问你最后用了哪几种细胞因子？效果怎么样？