成纤维细胞的电转

lorey

将同样的质粒电转到两个不同的成纤维细胞系，运用同样的程序，一个很好，一个死亡，有那些原因造成这样的结果呢？, H! v7 X0 Y) ]! ^
注：成纤维细胞本身生长很好的。

exin11

最好是有图片！！. P% i, d( H, N" S0 R/ K- L
步骤也好！' v" n) Y+ J: b" |) F0 z" W
以前质粒转染出现过这些原因导致失败的：
" E: z6 c+ q" AHBSS的ph，不同细胞系所需的ph条件不同，须事先验证（做一梯度）；: H, B: ^3 p" T$ r% g
细胞系的代数。: y" ^) Q" r0 k! t: [2 Q
其他的原因没出现过。
; j& R' y' k. z, T; }7 B- N- P

starlancer

回复 lorey 的帖子6 L' z2 n& J( O0 E
* C* |# O  T- t* Z7 G: ]
不好说。对于不同细胞系，我觉得关键是摸索电转条件，不知道你的条件是不是都是确保没有问题的。可能性最大的还是电转条件的问题。我觉得对于成纤维细胞系这种细胞，完全不用电转这么麻烦，要摸索条件而且致死率有点高，直接脂质体或者病毒转染多方便。

lorey

回复 exin11 的帖子- p2 }1 f1 F1 K' E+ _, J2 p. |
1 P+ z$ C: v$ i; A5 w% }6 w
谢谢了，是让别人帮忙做的。按照很成熟的一套方案进行的。电极液是老师配的，可能与买的不太一样吧！细胞系是第4代。

lorey

回复 starlancer 的帖子+ z# h, D& |  \' Q$ f1 ]( o
9 ]/ J1 o+ P) i) A! x5 `$ `
谢谢了。我们的质粒最好电转才行。条件也算是成熟吧，是否是由于我的细胞不好了呢？

starlancer

回复 lorey 的帖子
* m6 I2 b( u$ {5 W1 y
8 c8 ~- t+ U9 d3 y" b  l  p不好说，我觉得是电转条件的可能性大一些，不同细胞系的条件都是不一样的。你们原来转染这个细胞系的时候效果如何，如果原来这个条件就可以的话，那就可能是细胞的问题了

cony

不同细胞系，用同一电转条件，当然有不同的效果。