酶切后DNA电泳能看见泳道，为何没有条带？

sniper

提取基因组后，电泳有结果。为何加完内切酶就跑不出带来了呢？哪位高手指点一二

aminhair

这个需要看图片才行!  一、确定操作无误，肯定加入了酶！没有溜号吧？  二、genome DNA 溶剂是什么，保存条件是什么？是不是降解了？可以从新电泳分析一下DNA条带。  三、酶切条件：包括温度和buffer的效率。重新检查并结合以前的实验经验再审视一下目前的结果！   祝你好运！

amosummer

有没有和没有酶切的做对照呢？还有就是检测酶是不是有效，可以切一下以前能切开的DNA对照。

jun8013

会不会切得时间太长了，长了就切碎了啊

绿雪

你做酶切的时候用了多少DNA？酶切完之后上样多少呢？上样量少的话肯定是看不到的啦。

sniper

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, h$ q# T/ B$ `) {& g: \* f9 K0 F+ j" L% I7 U# y, S
酶肯定加了，用TE溶的，保存在4℃，37℃酶切。因为不好我没照相，只能看到又跑过的痕迹，但痕迹又没有超过胶的范围

sniper

回复 jun8013 的帖子
! d" I# p5 ~+ q6 o3 V+ d! k
& C  F( x% X2 C" R" p+ e5 X请问，内切酶不是有特异性的切割为点吗？时间长会切碎吗？

sniper

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: H* G( N/ B- |- a/ v5 W0 E我也是看文献做的，酶切用2微克大约20微升，上样2微升。请问这样少吗？

张也行

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: q5 X' {+ F3 z" v8 b9 Z你也太小气了，就切那么多，上样还那么少，多点几微升再看看。呵呵... ...

sniper

回复 张也行 的帖子* \' Z8 f5 Y8 o1 B  d# T

* Y! t1 j( y6 }# |% m3 N也对哈，不过我只是忠于试剂盒的要求。谢谢啦，我试试看
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