如何分离ips克隆

docqbzcn

在重编程获得ips克隆后，如何有效的分离克隆？各位有什么好的方法啊？

fananran2003

胶原酶消化，就行了，- t* Y/ B% l8 o

张也行

这要看是哪个物种的了，详细点。

docqbzcn

人牙周膜干细胞重编程得到ipscs,如何分离啊？

docqbzcn

回复 fananran2003 的帖子$ j( _! J& a( ]. N% p
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胶原酶消化，就和未重编程或部分重编程的细胞混了吧，能否只把完全重编程的细胞克隆分离出来？

fananran2003

你用是细胞系有没有筛选marker，要是没有，那怎么能区分partially reprogramed cells and fully reprogramed cells ？

ghfvcat

回复 docqbzcn 的帖子7 H' g2 Q+ c6 \5 I) o
' a$ n/ o7 @# q  K/ Y" g7 Z
看准了位置用细胞铲子刮下来哈，或者枪头也行，不过难度高了点

docqbzcn

没有marker啊，有谁懂clone cylinder的具体步骤啊？谢谢

yangpan521

拉出较细的玻璃针，在显微镜下挑取集落，就行了

ghfvcat

回复 docqbzcn 的帖子4 b; Y: W- c- L1 G- f6 S+ b3 }, k
# m/ L- E' a2 U0 O9 W2 @
看到克隆了么？看到了随便什么东西不能挑啊，有筛选标记的也是看准了地方挑的，看准了克隆，枪头把它刮下来传代不就行了么？肉眼实在看不见就在显微镜下挑罢8 r$ D+ @1 ~$ i4 D- M5 X) E
至于混起来的没重编程的细胞，一两代后不就干净了么？