干细胞之家 - 中国干细胞行业门户第一站

注册

找回密码

 

 

搜索
干细胞之家 - 中国干细胞行业门户第一站 › 干细胞之家论坛 › 干细胞实验室技术交流 › 实验室综合讨论区 › western blot 膜再生液（一抗洗脱液）配方
中源协和

免疫细胞治疗专区

欢迎关注干细胞微信公众号

  
查看: 318922|回复: 12
 go

[请教] western blot 膜再生液（一抗洗脱液）配方 [复制链接]

runsong

Rank: 3Rank: 3

积分
955 
威望
955  
包包
755  

热心会员 优秀会员 小小研究员 积极份子 帅哥研究员 美女研究员 金话筒 精华勋章

楼主
发表于 2011-3-25 17:44 |只看该作者 |倒序浏览 |打印
干细胞之家微信公众号
66包包
做western blot时有时因为蛋白样品少，希望将一抗洗脱掉，再砸其他抗体。/ d; `' f, [- ]& O/ `
望前辈提供配方。
: b% O* c. z8 j, B! k注：我们不想买商品化的，以节约经费。

最佳答案

amigel 查看完整内容

我们实验室一直用的，放心绝对work
收藏0 分享0 顶0 踩0
回复 引用

举报 返回顶部

amigel

Rank: 2

积分
116 
威望
116  
包包
566  
沙发
发表于 2011-3-25 17:44 |只看该作者
我们实验室一直用的，放心绝对work
已有 1 人评分威望 包包 收起 理由
细胞海洋 + 2 + 5 欢迎参与讨论

总评分: 威望 + 2  包包 + 5   查看全部评分

回复 引用

举报 返回顶部

runsong

Rank: 3Rank: 3

积分
955 
威望
955  
包包
755  

热心会员 优秀会员 小小研究员 积极份子 帅哥研究员 美女研究员 金话筒 精华勋章

藤椅
发表于 2011-3-25 19:12 |只看该作者
顶起
回复 引用

举报 返回顶部

amigel

Rank: 2

积分
116 
威望
116  
包包
566  
板凳
发表于 2011-3-25 20:36 |只看该作者
Stripping Buffer:: }( `, ~. H1 D: o
4.925 g Tris-HCl (pH to 6.7 in 200 ml of dH2O)  final = 0.0625 M
' T6 ~% E; G2 K7 |3.52 ml ß-mercaptoethanol
! H+ K" U, Z5 w5 _2 b$ ]10 g SDS- _3 g  B7 r3 R. ?
Fill to 500 ml with dH2O; j. K0 P" l& Y8 \, S9 R& M4 k0 A

% P  q* z: |: a. S50度水浴保温30min后取出用大量TBST洗，封闭后再用抗体检测
已有 1 人评分威望 包包 收起 理由
细胞海洋 + 10 + 20 欢迎参与讨论

总评分: 威望 + 10  包包 + 20   查看全部评分

回复 引用

举报 返回顶部

amigel

Rank: 2

积分
116 
威望
116  
包包
566  
报纸
发表于 2011-3-25 20:40 |只看该作者
上面配方中是3.52ml beta-巯基乙醇
回复 引用

举报 返回顶部

runsong

Rank: 3Rank: 3

积分
955 
威望
955  
包包
755  

热心会员 优秀会员 小小研究员 积极份子 帅哥研究员 美女研究员 金话筒 精华勋章

地板
发表于 2011-3-25 21:19 |只看该作者
回复 amigel 的帖子$ a  w! d& h0 J- O
0 \" f3 S' |" _! g/ q
这是你在网上找的还是你们实验室里验证过的
回复 引用

举报 返回顶部

siyue13

Rank: 2

积分
167 
威望
167  
包包
903  
7楼
发表于 2011-3-25 23:15 |只看该作者
商品化的，才几百块一瓶，不贵的
已有 1 人评分威望 包包 收起 理由
细胞海洋 + 2 + 5 欢迎参与讨论

总评分: 威望 + 2  包包 + 5   查看全部评分

回复 引用

举报 返回顶部

hcluo

Rank: 7Rank: 7Rank: 7

积分
1199 
威望
1199  
包包
4174  

优秀版主 优秀会员 金话筒

8楼
发表于 2011-4-28 16:49 |只看该作者
本实验室使用的strips液：
$ O9 c# H9 Q6 ]0 Y: ^0.5M TRIs HCL (PH 6.8)   6.25ml2 v! I- W/ N4 q3 c7 D
巯基乙醇                         52ul
2 _) B# R( C7 y20%sds                           5ml( R: s( p& @+ M0 ?* {% m$ n
加水至50ml
1 ?' i8 F; D- C" g% e6 \
已有 1 人评分威望 包包 收起 理由
细胞海洋 + 10 + 20 欢迎参与讨论

总评分: 威望 + 10  包包 + 20   查看全部评分

回复 引用

举报 返回顶部

王乾

Rank: 4

积分
1028 
威望
1028  
包包
1482  

优秀会员 金话筒

9楼
发表于 2011-4-28 22:17 |只看该作者
给你个最简单的，0.8M 的氢氧化钠30秒即可。
已有 2 人评分威望 包包 收起 理由
runsong + 1 + 2 谢谢指点
细胞海洋 + 2 + 10 欢迎参与讨论

总评分: 威望 + 3  包包 + 12   查看全部评分

回复 引用

举报 返回顶部

runsong

Rank: 3Rank: 3

积分
955 
威望
955  
包包
755  

热心会员 优秀会员 小小研究员 积极份子 帅哥研究员 美女研究员 金话筒 精华勋章

10楼
发表于 2011-4-29 21:45 |只看该作者
回复 王乾 的帖子( j. `' L5 k" g/ T: u# |

3 x" e6 C/ }' D" g$ U/ O: e! @谢谢，那温度有没有要求？
回复 引用

举报 返回顶部

‹ 上一主题|下一主题 ›
12下一页
返回列表 发新帖 回复
高级模式 | 发表帖子
B Color Image Link Quote Code Smilies
你需要登录后才可以回帖 登录 | 注册
验证问答 换一个

Archiver|干细胞之家 ( 吉ICP备2021004615号-3 )

GMT+8, 2026-9-26 04:03

Powered by Discuz! X1.5

© 2001-2010 Comsenz Inc.