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查看: 12993\|回复: 6	go [请教] 质粒的问题 [复制链接]

heiguzi1988

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楼主

发表于 2011-3-31 21:46 |只看该作者 |倒序浏览 |打印

我用的是PUC19 质粒。长度2.686Kb。而要连接的片段有2.9K大小。觉得这个PUC19 小了些，连接效率低了。是否有能够大一些的质粒？大小约在3.5K-6K左右为佳。（PUC19的条件都很好，唯独短了些。）要求是有个抗生素基因，含常用的多态性酶切位点区域，如果有可以做蓝白斑筛选的Lac Z基因最好，没有也没关系。请问谁能告知一下。谢谢啊！

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jun8013

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沙发

发表于 2011-3-31 22:28 |只看该作者

有lac的几乎都是3K左右，表达载体一般大，但是无lac z，只能用菌液PCR鉴定了

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jiays

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藤椅

发表于 2011-3-31 22:52 |只看该作者

PWPTS载体有amp抗性，链接2-3K没问题. Y8 e& D" t! e* d; u; L

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Pseudomonas

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板凳

发表于 2011-4-1 05:15 |只看该作者

pETBlue 质粒同时可以进行蓝白菌落筛选和T7启动子表达，大小是3.5kb，应该符合你的需要。Novagen的质粒。

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amigel

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报纸

发表于 2011-4-1 16:48 |只看该作者

pGEM-系列载体都可以吧,

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ambassador

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地板

发表于 2011-4-1 19:53 |只看该作者

本帖最后由 ambassador 于 2011-4-1 19:55 编辑
9 e# \& h$ n+ D$ \, i! C3 r
用这个吧！
PMXS-IRES-NEO,片段大小：5.822kb，. Y5 |' [* g9 ?7 ]& E# h1 Q
含有很多普遍的酶切微点，卡那霉素，新霉素抗性基因。
今天正好验证了这几条，你要的话我可以赠一点给你咯！