各位高手帮忙看下细胞出什么问题了！急！

阳光飘香

小鼠全骨髓培养的BMSCs，始终不贴壁

大海

奇怪 刚开始时可以看到细胞 后来没有了  是不是换液时把细胞洗掉了 刚长出来的细胞贴壁不紧 换液要小心 还有你的细胞貌似很少 是不是培养基不好 血清浓度太低 自己要多总结一下

阳光飘香

培养基是DMEM/F12，10%FBS，1%双抗，会有问题吗？全骨髓培养的细胞
/ ~, K* j0 T! L因为细胞始终不贴壁，一直都是离心后重放在培养基里的

大海

不会吧 你看看文献 哪有换液离心后又放进去的 你养的是贴壁细胞，而且明明你的前几张图片是贴壁的 前几次换液 要小心 不洗或者轻轻洗  直接把洗的液体倒掉就可以 我没见谁离心的 常规说你的血清浓度可以 但是有的血清质量确实不行 你可以再提高血清的浓度试一下 细胞养好应该没问题 祝你成功

阳光飘香

前几张是用多聚赖氨酸镀膜后养的，所以有贴壁的，后面几张是用没镀膜的培养瓶养的，始终不贴壁，三天全量换液都没有贴壁，所以就离心了再放回去

如来的观音

回复 阳光飘香 的帖子( o: }7 {8 F7 ~/ a( |; a7 H" \
+ N3 X& M+ n$ j0 I
我培养的hMSC用的是"阿发"DMEM,10%FBS,可是没加1%双抗的，细胞状态很好啊，为什么加双抗？

如来的观音

回复 阳光飘香 的帖子
$ v* ]. V  [( F9 t) r9 B# K- @) |* L
还不用离心的，你是消化传代时离心的吗？当用的消化液浓度不高量少时不用离心

gact

回复 如来的观音 的帖子+ n" b/ b& a' g  `

  b% g8 l, }1 Y4 {/ g# i, u) R你用PBS洗么？

jj2570782

前两天还是有些细胞贴壁的，后面估计你换液的动作太大了，细胞吸走了。
7 g* N% h" K  g# J5 ~5 q7 y我养的4小时左右就开始贴壁了，你加大血清浓度试试看，血清做好用进口的

hygene

小鼠BMSC第二天就可以贴壁的，从图片看出现较多细胞碎片。不知道你的培养基颜色有什么变化，可能是培养基的问题。