请问大家转染慢病毒载体时用什么转染试剂？

haijing12585

请问大家在慢病毒载体转染进入293T细胞时采用什么转染方法，用什么试剂？有没有什么要注意的事项？为什么我做的转染效率老是上不去呢？一般就在百分之二三十左右。

yeya

用磷酸钙转染法或者脂质体转染法。看看细胞状态怎么样，还有质粒DNA的质量。

jefferson

同意楼上意见+ r" l, U& E8 x: x& X
, I& ?6 j6 Y  S- m& a" f
转293T报道最多的是用Lipo2000, 效率很高. 如果条件比较稳定了, 用磷酸钙也不错, 成本很低,但要特别注意磷酸钙转染试剂的PH值, 对转染效率影响很大. ; X* R- n6 j* I

6 O: f& m1 K) l: |另外之前有战友说他转293T用Fugene6 比Lipo2000高, 所以建议你几种试剂如果都有的话都可以做个比对实验.
9 P* S/ ^! P8 c* n4 t
0 Y% Z! f4 c0 m8 }+ L) r另外转染有很多细节会影响到效率,比如细胞状态, DNA纯度, 具体操作, 转染试剂和DNA的比例等等, 做转染论坛里有很多帖子, 你可以搜下.

guitaoips

Fugene HD效果其实是很不错的，我之前转过绿油油的一片，不过有时也会出现效率不高的情况，我个人觉得还是和细胞的状态关系最大。

sun_happone

我们用的是脂质体Lipo2000，还不错

gact

改变转染试剂，试试看，不行的话，，就考虑细胞 的原因。。
6 [1 N! I+ d* J! h( Z据说293t细胞在20代内比较高效率。。, q: @# A! ~  W