小鼠IPS细胞传代问题

catmemory

看到前几天的帖子上说小鼠IPS细胞胰酶消化传代，分化率会很高，那用什么方法小鼠ips细胞传代培养分化会减少呢，有什么权威的文献吗？  l5 ?* L$ X0 }+ v0 K  w0 A
另问小鼠ips细胞的冻存液怎么配置呢？必须要ips培养基加DMSO吗？

figo1115

没做过iPS   但现在有一些其它的细胞解离液   像GiBCO 的typle    还有什么accurate 吧
5 R9 m; c1 L4 R) w6 ^  e6 B
" y7 R7 s/ ~( p4 p. H这些对细胞作用非常温和，还有就是不用含血清培养基终止消化等优点.
3 z' h3 N1 y" p7 k+ C  M6 |
8 M- K7 A8 B8 H( g" b  J0 a- b5 W但具体名字记不太清楚  你可以关注一下  

wxyWXY

0.05%的胰酶消化  冻存液10%dmso+90％就可以

wxyWXY

10％dmso+90％fbs就可以

catmemory

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. f: x* K1 i, ^* b% [
& C7 ?7 j( o1 Sxiexie~~

catmemory

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3 j% v2 w; V( L% E$ y) T' J5 c/ Q) B! u
FBS是普通的血清还是干细胞专用血清呢

catmemory

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) G0 L4 E0 u+ ]8 ^$ ~1 U$ H  a, G# L+ x' a3 J; E6 ~
90%的啥呢？

zhangxf0928

难道是90%的血清？
$ l! ]+ Y; D& n4 C) K' ~$ Y那就是10mlDMSO+90ml血清？
5 C! I. Q. ^; ^4 a' ^+ l" V! k不会吧？

wxyWXY

10%DMSO+90%血清  一般得血清就可以  冻存液每次不能配很多 一般配好后一周内用完 4度保存 / q% q6 y7 D7 ~7 [, c: b' B) L% @& j
配100ml太多了吧

yangpan521

培养液中加入lif,用dispase2消化，应该会好点; q$ w. c7 {+ J2 X/ C