脐带间充质细胞原代培养

gaorongbest

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哦,我说的没有细胞是指细胞量特别少,太少了

zarecol

检查下你的离心机吧，或者胶原酶，不行使用别的型号的胶原酶试试吧，或者使用胰酶，这两种酶效果都不错的。

sunjianhua2000

我用的二酶是胶原酶，我看文献上写的方法不太一致，有的人说酶消化法四度过夜消化后细胞比较多，还有的消化一个小时就说细胞比较多。具体的我也没做过，而目前我的实验都采用的是组织块贴壁培养，虽然还没达到理想效果，但还在摸索过程中，祝你实验顺利，期待和你一起分享实验技术

sunjianhua2000

胰酶我现在用的是GIBICOL的

gaorongbest

回复 sunjianhua2000 的帖子
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: C! G$ K  ~# }2 |/ A7 f我们现在都用组织块贴壁法培养，不用消化法了；组织块就是培养时间长，但是成功率高一些，等长10-12天就可以传代了，我们现在都传到7，8代了，细胞长得不错，祝你成功啊

sunjianhua2000

回复 gaorongbest 的帖子2 {9 j" {6 p+ I9 q

  N8 @. |& n# G8 n: _我已加你为好友了，那你能把你脐带培养过程的流程具体告诉我一下。包括试剂，血清，还有原代处理以及原代培养中所注意事项。

lizzy_81

消化跟酶的类型，酶的浓度，消化时间，温度都有关系，多查些文献参考一下吧

zg_zj_hz_xyj@ya

能看到细胞，应该就能收集到。会不会消化后回收不完全，可以试着把洗涤液也回收。或者离心力不够，没能形成细胞沉积？

大少爷

我们也做呢，用胰酶消化三到五分钟即可，效果很好。直接收集起来过滤离心后也是有细胞的，而且细胞得率很高。消化时间长了细胞都挂了。

cactus006

回复 gaorongbest 的帖子. N3 V( e( s. I6 @8 `" u( B
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我用组织块儿贴壁法培养了已经四天了，还没有细胞爬出来，纠结呢！我在培养的时候只加了覆盖住底面的培养基，两天后补加的培养基，是不是补加培养基晚了呢？请教您帮我分析下原因了，谢谢！