关于台盼蓝染色

conggu

大家在活细胞计数时，是如何使用台盼蓝的呀？是1:9混合还是1：1混合呀？

LiuRoc

1：9

鹭岛之滨

1:9呢

hualin840518

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细胞活力鉴定——台盼蓝染色法
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# u# l0 M9 G6 k原理：  N6 \2 `5 Q% U* x/ Z3 Z# c& _5 v
细胞损伤或死亡时，台盼蓝可穿透变性的细胞膜，与解体的DNA 结合，使其着色。而活细胞能阻止染料进入细胞内。故可以鉴别死细胞与活细胞。
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6 ^6 z; g3 m2 I+ n* Z用品：- b0 |+ A$ n) C7 s8 R8 \2 m
1. 4%台盼蓝母液：称取4g台盼蓝，加少量蒸馏水研磨，加双蒸水至100ml，用滤纸过滤，4度保存。使用时。用PBS稀释至0.4%。3 L# d/ R5 y% R: D& ^
2. 吸管、血细胞计数板、显微镜
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步骤：; V1 e$ D9 h+ r$ m& L  S) N! w( }
1、制备单细胞悬液。并作适当稀释（106 细胞/ml）
1 b1 `* T7 S: C, d) {9 D7 X, s: a2 I2、染色：细胞悬液与0.4%台盼蓝溶液以9:1混合混匀。
- h; s% K2 j% t- K/ F3、计数：在三分钟内，用计数板分别计数活细胞和死细胞
1 K' g5 j2 U# |# z) K0 C3 _; Q- f. T5 p8 z( i8 a% Q7 \2 A! @, ^# Y* S
结果统计：
& n, `% {9 ~. A- _& ^5 ?镜下观察，死细胞被染成淡蓝色，而活细胞拒染。
5 v( v/ ?- Z" k* G根据下式求细胞活力：
) l% U: e/ l; V6 w$ g& D5 ?活细胞率（%）= 活细胞总数/（活细胞总数+死细胞总数）×1005 c; b3 k7 o8 c+ \8 |$ ^

( ?4 c2 b" d" @, R. J注意事项：台盼蓝染细胞时，时间不宜过长。否则，部分活细胞也会着色，会干扰计数。
5 m- d  w& c0 o8 n! {! X6 |* U

conggu

谢谢楼上，很详细。

王乾

1:1，染得更好一点

tingwuyu

1:9与1：1我都试过，感觉结果没什么不同，就是1:9的镜下颜色会浅一些，1:1会比较深，个人感觉1:9好些

osterix

1：1可能会产生干扰噪声，即背景会高一些，有时候不太好分析。1：9呢，染色浅点，区分的很好。建议1:9

aibi1983

建议1:9，因为1:1假阳性会很多

透明微笑

建议1:9