原代脐带MSCs培养，胶原酶消化20cm能获得多少细胞？

askage

回复 death0270 的帖子
: \$ }8 i: W5 Y* T" }0 C, Z# T$ N' t1 g& G* N* ]8 _  P9 `
请问下，胶原酶消化法，浓度多大，消化多长时间就可以

death0270

我们是用IV型胶原酶，浓度1g/L，恒温振荡消化3小时，3-5天就可以有80%-90%的融合度了。

aibi1983

我们用的组织块法直接貼壁生长，14天左右可以长满。细胞长的不错

leungyk

回复 aibi1983 的帖子4 b8 z8 `+ p/ I3 R5 R( [* [4 A9 |
0 |- A- d: O; X1 c% h
請問~ 貼壁法要幾多天才搬走組织塊？
* Q  {3 u+ D- A/ K# }謝謝！

death0270

一般5-7天就可以看见细胞爬出，我们图省事都是7天才移走组织块的

aibi1983

就是等细胞爬出来，并且在组织块周围已达到60-70%汇合时就可以去掉了

lyrsea

回复 death0270 的帖子. D( @3 P8 F! i0 }3 {; n

2 `, |* N- }* j4 v$ T% }1 y# V您好，我们实验室也做脐带间充质干细胞的培养，也使用IV型胶原酶，浓度1g/L，恒温振荡消化3小时，细胞密度大约2x106/ml ，但是过了几天无细胞不贴壁，请问您们使用何种培养基，还是我们的细胞密度过低。谢谢

细胞海洋

回复 lyrsea 的帖子
( J" n5 Z8 v! y% v, q6 o2 h6 T) r
建议你发新帖提问

death0270

你们脐带取的什么部分来进行消化的？我们用胶原酶消化是需要取华尔通氏胶来进行消化的，如果只是单纯的用整个脐带消化，那样必须延长胶原酶消化时间才行。另外我们的起始细胞密度是1x10~5/cm2,80目筛网过滤，并且离心去除上清。培养基是UItraCULTURE 无血清培养基。

lyrsea

谢谢！ 我们实验室是将血管去除，切小块后加入酶消化的，用得也是UItraCULTURE 无血清培养基，里面添加了L-Glutamian。