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求助悬浮培养神经干细胞出现难题 [复制链接]

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楼主
发表于 2011-5-17 10:15 |只看该作者 |倒序浏览 |打印
干细胞之家微信公众号
本帖最后由 细胞海洋 于 2011-5-17 10:21 编辑 + t# J7 b+ G1 D) d2 q
& ]0 W+ v& E7 z
悬浮培养神经干细胞出现难题,我取得的是出生24h的SD鼠的海马区,得到的细胞杂质很多,用ACCUTASE酶的消化结果也很不好,在培养2,3天后大量细胞死亡,活着的非常少,请问是什么缘故?( f7 ~  _' D/ i7 C: M0 `+ x
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沙发
发表于 2011-5-17 15:53 |只看该作者
在线等~

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藤椅
发表于 2011-5-17 21:29 |只看该作者
本帖最后由 cphh 于 2011-5-17 21:30 编辑
6 g+ @; W+ _+ i: _* v( {! T4 y" Z: p
我们使用木瓜蛋白酶消化,多吹打,50次左右,最后200目筛网过滤,这样杂质就比较少了,你可以试试看。(注:我们用的是成年鼠脑组织)
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板凳
发表于 2011-5-18 13:52 |只看该作者
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7 H/ ]6 y% c/ {# Y$ a2 o9 q& n, |, x+ z, Q
多谢!!!

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报纸
发表于 2011-6-20 19:52 |只看该作者
我是直接机械吹打200次消化得 之后200目筛网过滤
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地板
发表于 2011-6-28 17:27 |只看该作者
回复 cphh 的帖子
! Y" B$ g- i+ T: e4 l
  L9 `6 @  T5 l9 e+ _请问你做成年神经干细胞么!我也是木瓜酶消化的,37度15min,但原代液体很浑浊,传代后,细胞就会死一部分,这是什么原因呢?方便留给我你的QQ号么?谢谢!

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7楼
发表于 2011-7-2 23:40 |只看该作者
请教:成年神经干细胞培养时,原代接种液很浑浊,分不清是污染还是消化不充分?不能用胰酶消化么?
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