请高手帮我看看小鼠MSC,有问题求助

大少爷

判断胰酶消化的时间可以在显微镜下观察细胞状态就行了。消化下来的细胞是MSC.未消化下来的细胞是杂细胞.可以室温消化。

1301918986

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呵呵，说错了是48h全量换液，去除血细胞。

759512199

全骨髓法培养的原代杂细胞就是很多，可以通过传代除去。第一次传代时细胞密度不要太大，1:1传代就好了。

生物化学zy

回复 1301918986 的帖子  `9 J7 |- E$ }+ f' _! H! |+ c+ h

1 K7 T' [: p) _7 L; J太敬业了,谢谢.

生物化学zy

回复 759512199 的帖子. T9 @# K: P6 f1 U+ h* n
& ]+ K5 q9 o0 h/ J9 _1 v
传到第几代时,细胞会比较纯?基本没有杂细胞了?我想诱导分化用,第几代时进行诱导分化

生物化学zy

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* y" P1 R& `$ U3 E$ l) }2 U传到第几代时,细胞会比较纯?基本没有杂细胞了?我想诱导分化用,第几代时进行诱导分化

1301918986

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3 l: G8 E8 J- ^2 N0 M3 {1 t& G' F1 G# F% p/ u# h
呵呵，一般在二三代就比较纯了。至于第几代进行诱导分化这个我没做过，不是很清楚。

tingwuyu

应该是破骨细胞，那个贴壁比较牢，可以通过胰酶消化的方法去除，可以加胰酶后放置于培养箱内5min后即可基本将MSC消化下来，一般传至3代即可纯化。

759512199

回复 生物化学zy 的帖子5 W8 i9 o4 @) \$ s+ t# d

4 d# m; {& F9 X! _' P- K# A到第3代左右MSC基本上就比较纯了。做分化的话三四代就可以试着做，因为随着MSC的传代干性可能降低，细胞也会老化。

生物化学zy

回复 759512199 的帖子. B( T2 w* g/ n2 P6 G
3 c: x) C- F: f( ~& m0 t, o  S& X/ q
谢谢,了解了