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楼主: 生物化学zy
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请高手帮我看看小鼠MSC,有问题求助   [复制链接]

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发表于 2011-6-11 16:46 |只看该作者
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回复 759512199 的帖子/ w, t5 U! N" b7 U, Z: w

6 x" h$ f( L4 d) l, C* L& _MSC在细胞6孔板中,1孔冻存一管后,复苏6孔板的1个孔,密度会小吗?还是说,冻存的时候细胞就少?如果是这样的话,建议多大板子冻1管?
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发表于 2011-6-11 16:47 |只看该作者
回复 tingwuyu 的帖子
7 y0 T5 s% b0 b3 X8 J5 c+ j. f2 B4 @0 Z, U4 n( z8 q( ?  h7 G
MSC在细胞6孔板中,1孔冻存一管后,复苏6孔板的1个孔,密度会小吗?还是说,冻存的时候细胞就少?如果是这样的话,建议多大板子冻1管? # h/ h. e+ y8 ?. b4 Z) A

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发表于 2011-6-11 16:47 |只看该作者
回复 1301918986 的帖子7 ~$ G% L" c& r3 W; @

4 q( r$ N7 U3 y2 o$ mMSC在细胞6孔板中,1孔冻存一管后,复苏6孔板的1个孔,密度会小吗?还是说,冻存的时候细胞就少?如果是这样的话,建议多大板子冻1管?
7 ]7 }, r* s6 Q

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发表于 2011-6-11 17:25 |只看该作者
回复 生物化学zy 的帖子! r; Q8 e7 f1 V+ \2 c: v; z# D, {
6 A5 |1 l8 `# N
冻存再复苏细胞死掉一下很正常,冻存液和低温本身就对细胞有一定的伤害。操作好的话活细胞率可达95%以上。你也没有必要深究多大板子冻一管,一管冻多少无所谓,关键是你复苏时需要多少细胞。你可以冻存之前把细胞记一下数,然后一个冻存管就冻一定量的细胞,需要时用多少就复苏多少。
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发表于 2011-6-14 10:41 |只看该作者
你的protocol是参照哪个paper?

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发表于 2011-6-14 16:13 |只看该作者
感觉细胞形态不太好,不像梭形的成纤维细胞。可能是杂细胞较多。1 h0 N7 c1 R2 _$ A0 D
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发表于 2011-6-14 17:59 |只看该作者
回复 生物化学zy 的帖子0 f% l! B8 ?& M/ u$ V4 ?

' @0 k7 Z2 L9 A( o4 }. e; i这个就不是很清楚了,MSC细胞分化跟培养基成分也是有关的!原代的MSC一般都是长的比较慢!经过传代之后就快很多!
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发表于 2011-6-14 19:00 |只看该作者
看你这细胞的状态应能涨起来。8 s+ u' w% [* j* w4 c" `
我们一般三天换液。
. s9 O5 J5 R8 v  C# ~# ~4 a你这个密度一传二较合适,不用1:1传。
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