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楼主: Sophia	go [请教] 免疫荧光染色 [复制链接]

dongxin

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优秀会员金话筒

11楼

发表于 2011-8-3 11:03 |只看该作者

我也用过激光共聚焦来成像，单通道分别拍照，再用Image J软件叠加，效果也挺好的！; ]/ E% o' z `
至于封闭液，我们用的就是BSA！1 R6 S. S/ ]) b$ a$ K

共同学习，进步！

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rain2402

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12楼

发表于 2011-8-3 11:23 |只看该作者

免疫荧光染色，想要进行双标，染两个抗体，具体操作。6 G6 Y4 L! R5 ^" k
比如你的一抗1是鼠抗微管蛋白的，对应的二抗是绿色荧光标记的羊抗鼠抗体。一抗2是兔抗线粒体的，对应的二抗是红色荧光标记的羊抗兔抗体。步骤是加入一抗1和一抗2，4℃过夜，然后封闭一段时间，加入2种二抗。作用一段时间后就可以去照相了，不同的激发光下会有不同的荧光。单通道的就要单独照了。