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楼主: Sophia
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[请教] 免疫荧光染色   [复制链接]

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发表于 2011-8-3 11:03 |只看该作者
我也用过激光共聚焦来成像,单通道分别拍照,再用Image J软件叠加,效果也挺好的!; ]/ E% o' z  `
至于封闭液,我们用的就是BSA!1 R6 S. S/ ]) b$ a$ K

+ o/ ]/ K% T( e+ I; _2 W& m$ }/ J9 b$ j共同学习,进步!
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发表于 2011-8-3 11:23 |只看该作者
免疫荧光染色,想要进行双标,染两个抗体,具体操作。6 G6 Y4 L! R5 ^" k
比如你的一抗1是鼠抗微管蛋白的,对应的二抗是绿色荧光标记的羊抗鼠抗体。一抗2是兔抗线粒体的,对应的二抗是红色荧光标记的羊抗兔抗体。步骤是加入一抗1和一抗2,4℃过夜,然后封闭一段时间,加入2种二抗。作用一段时间后就可以去照相了,不同的激发光下会有不同的荧光。单通道的就要单独照了。
2 p$ ?% ^% Y& {: I2 q
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发表于 2011-8-3 11:59 |只看该作者
一抗分别用兔和小鼠,二抗分别用FITC和罗丹明标记的抗小鼠和抗兔抗体,
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发表于 2011-8-5 12:31 |只看该作者
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弱弱的问下,免疫荧光是荧光原位杂交吗?

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发表于 2011-8-5 12:31 |只看该作者
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6 i8 i6 a: g8 ]& W# h
: T! `3 j* \  a) W1 \3 x你好,请问下怎么用软件叠加啊?

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优秀会员 金话筒

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发表于 2011-8-5 15:52 |只看该作者
回复 zxdlala 的帖子
6 D, D1 Z2 B, i0 w0 U. P, j2 [- U& b, e& ^9 T+ o9 d
是软件自带的功能
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