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楼主: Sophia
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[请教] 免疫荧光染色   [复制链接]

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发表于 2011-8-3 11:03 |只看该作者
我也用过激光共聚焦来成像,单通道分别拍照,再用Image J软件叠加,效果也挺好的!
9 p7 b! T4 A* @. k2 Z至于封闭液,我们用的就是BSA!
0 d! c+ B6 w( }. S& _7 h% m7 B& \
共同学习,进步!
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发表于 2011-8-3 11:23 |只看该作者
免疫荧光染色,想要进行双标,染两个抗体,具体操作。
4 u0 B1 q8 T) c7 k/ f  ~比如你的一抗1是鼠抗微管蛋白的,对应的二抗是绿色荧光标记的羊抗鼠抗体。一抗2是兔抗线粒体的,对应的二抗是红色荧光标记的羊抗兔抗体。步骤是加入一抗1和一抗2,4℃过夜,然后封闭一段时间,加入2种二抗。作用一段时间后就可以去照相了,不同的激发光下会有不同的荧光。单通道的就要单独照了。( G4 K6 E1 ~1 l2 T) W" ~+ m
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发表于 2011-8-3 11:59 |只看该作者
一抗分别用兔和小鼠,二抗分别用FITC和罗丹明标记的抗小鼠和抗兔抗体,
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发表于 2011-8-5 12:31 |只看该作者
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弱弱的问下,免疫荧光是荧光原位杂交吗?

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发表于 2011-8-5 12:31 |只看该作者
回复 dongxin 的帖子5 x/ h4 ~/ ]$ c* z8 e

8 Z& |$ A9 |! a$ T% X你好,请问下怎么用软件叠加啊?

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优秀会员 金话筒

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发表于 2011-8-5 15:52 |只看该作者
回复 zxdlala 的帖子: z3 i3 B9 I: S

; m+ z( r% W# ^# [是软件自带的功能
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