ips复苏的问题

细胞-77

我们实验室是把要复苏的细胞进行十倍稀释，然后离心，离心后用加含有Y27632的培养液重悬，不可以把细胞吹成单个，这样细胞不宜形成克隆，而且容易分化。

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' O' h, P) k* m, r
y27632都是i在哪买，使用量是多少

前途似锦

是人的？怎么看着细胞那么不园乎？

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回复 前途似锦 的帖子0 x( E& }: F" L0 ^

# }( f4 |: d# z2 y+ B% c: V+ j' }是人的，可能 状态不好吧

wolfgang

鼠的iPS单细胞是必须的。人的相反，必须保持团块状。

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Y27632使用量是多少 ？？？？

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回复 guoanson 的帖子
3 j: R4 A2 b4 d/ Z; D: t0 _$ X' @! }, u
Y 要加多少
5 u/ E( N- Z; \1 _) U还有其他的？
' T, g6 g. d% ]7 i  l/ I7 U2 M8 k多谢啊

song58

个人经验：
! ?" P# Q  o( N$ q5 V2 B9 Z100nM，传代前后各处理8小时

573639471

回复 song58 的帖子) x" C. \" o* T. a8 ^
6 s, A# W# s6 k' K( \
Y27632 不是提高复苏存活率吗？是复苏后加入吧  咋是传代前后呢

song58

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, M7 N# g1 [$ M0 U* G0 b' \& O/ R9 s4 M' H8 l
恩，我现在很久没用过了，但是以前用的时候确实是在传代前后都处理，而且这个方法就是follow文献里的protocol。$ e( Y/ x0 x( a% f% ?7 a
+ f1 N; l- Q2 H
今天我特意搜了一下，应该可以作为参考
& {0 v" b) V* E( |0 v% r* bAn efficient and easy-to-use cryopreservation protocol for human ES and iPS cells.
" L# U) y7 a4 a3 h
" A8 P2 M2 S" A' GBaharvand H, Salekdeh GH, Taei A, Mollamohammadi S.
- P  _7 t) T. K2 V9 A* U5 k& n3 V
" m- W9 ~  p' Y3 q. \; ]. lNat Protoc. 2010;5(3):588-94. % r) e- z# `8 @! m* B  b  S