培养的肿瘤球不是球，而是团片状！

conanthird

肿瘤干细胞，无血清，添加生长因子，低粘附的板子。培养5d的图片。2w的结果也类似。请大家帮忙分析一下，结果正常否？原因何在？非常感谢！

WAX

图片！

山羊

5d？也太快了吧，我们实验室有人养乳腺癌干细胞最快也要一个星期
) }) J6 K% M0 H" E1 h, o  W8 G图片呢？

丁子

有两种可能，一是这种漂浮的细胞团只是一般细胞的简单聚集在一起，二种可能就是肿瘤细胞球就聚集在这些细胞团中，因为漂浮的细胞会聚集在一起，就算成球了，也会聚集在一起。鉴别的方法：可以吸取其中一孔的细胞，轻轻吹打，离心重新加入新的培养基中，观察看有没有球。如果全是单个的细胞，则没有成球。

amosummer

有些时候，细胞培养久了感觉也会像是细胞团而不是细胞球。细胞球的折光率会比较高，球形也会比较规则。还得看看成球的大小，如果有文献报道过的，看是不是相差太多。如果相差很多，说明可能是聚集而成的细胞团。按楼上的说法，先吹散，再传到其他孔内，观察成球情况。

conanthird

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非常感谢楼上各位的分析。前几天由于电脑没装PS，没法将图片缩小。故未上传。' w( ?' ~( q, e  U
图片分别是三株不同的细胞株。放大倍数都是50倍。培养的时间分别是8d，5d和2w。除了中间那株细胞外，另外几株细胞培养两周都如第一张图片所示的团块状。偶尔能发现如第三张图片似得球状。细胞在显微镜下观察，折光率很高，不是死细胞团。而且，我细胞接种密度很低，6孔板，每孔大概3万左右。且接种的前几天，细胞都很分散，最多能见到十几个细胞聚集成的团，应该不是接种时未吹散所致。

jitianxing7021

你接种的太密了！应该减少细胞数量！

aminhair

细胞在显微镜下观察，折光率很高，不是死细胞团。, x3 o: K- {' A5 R
这一条怎么解释？
4 D7 j8 F2 M' _- N& G( K

monk125

恩 看这样子 你还得等一段时间，现在都是些正常的肿瘤细胞因不能贴壁而团聚在一起，根本不是CSC细胞，你这得等一段时间，淘汰选择出CSC。不同细胞系成sphere的时间不一样，你现在可以摸索下条件，另外建议降低细胞密度!!!!! 不然即使存在CSC细胞，也会因细胞团聚在一起，位于中间的细胞得不到营养而凋亡。。。。。。。CSC细胞所占的比例很小，，，，，所以你镜下看到的肯定不是你想要的  

conanthird

谢谢大家的分析。关于接种的细胞数量，我是这样考虑的：按照肿瘤细胞系中肿瘤干细胞的比率为0.1%，我在六孔板里，每孔接种3万细胞，那具有成球能力的细胞也只有30个而已，最后形成的球也只有30个左右。这样算来，接种密度并不高。