细胞培养过程中，怎样把间充质干细胞内混杂的内皮祖细胞去处~！！

elliotcc

在培养间充质干细胞过程中怎样把混杂的内皮祖细胞去处掉，大家有什么建议，请指点。. X& ~/ s; E( I7 u) N1 \
（比如说借用间充质干细胞比内皮祖细胞贴壁快的特点，或者两种细胞固有的特点什么的，）

chuanbaozang

关注中……

zerollx

回复 elliotcc 的帖子+ U1 z& q$ B% X+ g
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    利用内皮祖细胞与脂肪干细胞的贴壁能力的不同来进行纯化的，质量好的脂肪干细胞一般胰酶消化2分钟即可充分消化下来，而内皮祖细胞至少得3~4min，所以胰酶消化2分钟后即终止消化收集上清，皿底未贴壁的细胞不要吹打，只要轻微的洗下即可将残留的脂肪干细胞充分收集。同时脂肪干细胞增殖迅速，而内皮祖细胞则不如之，其比例将逐渐降低，多次如此传代后将会达到纯化的目的。

zgzjhzxyj

胰酶消化，1-2min就能消化下来，难消化的弃之，几次传代后就比较纯了

lgh1986

采用限制稀释培养法，5-10个细胞接种孔板，长出克隆的在消化扩增鉴定，这种方法得到的纯度非常高，我们实验室一般都采用这种方法，非常奏效。具体操作可以去网上搜索一下，不是很复杂，可能费事一点。

皮搋子

间充质干细胞投放的密度过低的话生长速度慢的能急死你。。。3 W( o+ l* e) b0 \/ E! s
所以最好的办法还是胰酶消化控制法。

lgh1986

是长得有点慢    但是想得到够纯的只有这样啦，一劳永逸嘛，不然之后做其他实验还没出结果还总怀疑是不是细胞纯度出了问题，杂细胞很难用肉眼分辨出来的哦。

cl5823283

多传代几次
& y/ S, J' \5 M) Y; K. u' {! K, N9 M

lianmudichui

内皮细胞长的快，胰酶消化法也不是很好控制啊，我现在也面临这个问题，希望有大侠继续支招，

menghy

请问以上的大侠们，如果将脐带动脉剥离，并将静脉内皮用手术刀刮弃，之后采用组织块贴壁法，在通过传代之后得到纯度是不是就可以满足要求了呢？, r) K5 z8 F) }9 z
谢谢！