MEF是先铺后灭活好还是先灭活后铺好？

cortex

大多数人会采用，处理一批，冻存，用时解冻，这样相对比较方便。当然先用现处理，状态要好一些。不过，如果细胞冻存处理的好，影响倒不是太大。至于楼主的问题，你确实不好保证你要的饲养层浓度。再者，这样可要好好洗洗细胞啊！

bigsnow55

christophe 发表于 2011-7-22 13:21 : Y4 V  ^8 Q2 F( z" D$ {% [
回复 dilal 的帖子  E  y; ^6 {, C$ M8 h  `1 B8 Y# {

- G. G1 e6 Z! V* y我是用的后一种方法，每次处理一大批，计数冻存，然后用的时候提前一天复苏就可以，感觉 ...

" b6 j1 I" j# x  P学习到了很多，我以前都是现用现处理，然后传一代，感觉很辛苦。5 p8 F  b; t4 D' s( R, ?% M: `
请问你们每管冻存MEF的数量是多少，种于多大的培养皿，冻存液的体积大概是多少，谢谢！
6 i/ f+ G% p+ I+ H2 c# m2 `$ ]6 B因为我想，如果是60mm培养皿，需要MEF细胞42X10000个，是否每管就冻这么多个细胞，还是考虑到复苏时有些细胞会死亡，冻存数量稍微多一点？

lindan666666

我们也是先丝裂霉素处理一大批，计数冻存，然后用的时候提前一天复苏就可以，死细胞很少，接种的ES细胞状体很好哦