MEF是先铺后灭活好还是先灭活后铺好？

cortex

大多数人会采用，处理一批，冻存，用时解冻，这样相对比较方便。当然先用现处理，状态要好一些。不过，如果细胞冻存处理的好，影响倒不是太大。至于楼主的问题，你确实不好保证你要的饲养层浓度。再者，这样可要好好洗洗细胞啊！

bigsnow55

christophe 发表于 2011-7-22 13:21 % b1 _: c. p0 M7 Y+ F' A0 B" D
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0 U1 Z. ?% p9 h) w( Y4 m; ]& b我是用的后一种方法，每次处理一大批，计数冻存，然后用的时候提前一天复苏就可以，感觉 ...

8 N9 V7 V8 ]6 F3 u0 d; L/ Y) ^学习到了很多，我以前都是现用现处理，然后传一代，感觉很辛苦。
' k' |( |9 a6 v% L# V% `7 n请问你们每管冻存MEF的数量是多少，种于多大的培养皿，冻存液的体积大概是多少，谢谢！
/ ^$ z8 K2 m! p& E! l  ^" ?因为我想，如果是60mm培养皿，需要MEF细胞42X10000个，是否每管就冻这么多个细胞，还是考虑到复苏时有些细胞会死亡，冻存数量稍微多一点？

lindan666666

我们也是先丝裂霉素处理一大批，计数冻存，然后用的时候提前一天复苏就可以，死细胞很少，接种的ES细胞状体很好哦