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楼主: dilal
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MEF是先铺后灭活好还是先灭活后铺好?   [复制链接]

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金话筒 优秀会员

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发表于 2011-12-20 09:50 |只看该作者
大多数人会采用,处理一批,冻存,用时解冻,这样相对比较方便。当然先用现处理,状态要好一些。不过,如果细胞冻存处理的好,影响倒不是太大。至于楼主的问题,你确实不好保证你要的饲养层浓度。再者,这样可要好好洗洗细胞啊!
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发表于 2011-12-20 22:41 |只看该作者
christophe 发表于 2011-7-22 13:21
( \( s+ j* L1 h  s7 m9 }3 \回复 dilal 的帖子! w0 H4 t; w+ L& U! r
0 C$ p% n$ V+ p7 S
我是用的后一种方法,每次处理一大批,计数冻存,然后用的时候提前一天复苏就可以,感觉 ...
7 G) e) h7 g3 L
学习到了很多,我以前都是现用现处理,然后传一代,感觉很辛苦。
+ l3 X9 }& h7 o. G请问你们每管冻存MEF的数量是多少,种于多大的培养皿,冻存液的体积大概是多少,谢谢!4 q8 G$ Y6 U1 P2 e* h$ {; V
因为我想,如果是60mm培养皿,需要MEF细胞42X10000个,是否每管就冻这么多个细胞,还是考虑到复苏时有些细胞会死亡,冻存数量稍微多一点?
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发表于 2011-12-27 16:17 |只看该作者
我们也是先丝裂霉素处理一大批,计数冻存,然后用的时候提前一天复苏就可以,死细胞很少,接种的ES细胞状体很好哦
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