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[请教] 普通PCR制胶问题   [复制链接]

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包包
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楼主
发表于 2011-7-23 16:38 |只看该作者 |倒序浏览 |打印
一半绿色一半蓝色 本人使用北京六一厂的电泳仪,制0.25g琼脂糖/25ml的1%的胶,加入3微升的GOLDVIEW,为什么紫外灯下看出现这样的结果? 一半绿色一半蓝色
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沙发
发表于 2011-7-23 17:23 |只看该作者
我以前用GOLDVIEW在紫外下看也是一半一半的,感觉染料会在电泳的时候跟着跑,所以现在还是用EB了。。。
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藤椅
发表于 2011-7-23 19:34 |只看该作者
没用过GOLDVIEW,感觉EB挺好的啊,虽然有点毒性,但实验时自己多加注意就没事啦!!!
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板凳
发表于 2011-7-23 20:29 |只看该作者
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为什么不用EB 感觉还可以吧
1 D/ N2 F2 ?7 W$ w1 ?3 s有毒,但是我们老板说国外的很多牛人根本不用手套 裸手抓都行
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报纸
发表于 2011-7-23 20:34 |只看该作者
回复 like_gj 的帖子) a( S, ^, _# |7 D
" S8 e3 l7 T0 J4 s6 W
以前传说国内牛人,现在传说国外了?
  a4 K' i8 r! L0 q8 L* u
+ o8 k9 R5 J6 p) y. f# N呵呵. s/ i3 O% C4 T8 ]
1 C+ j1 s# Y# ^$ x* A* f7 m
还是小心点好,健康第一

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地板
发表于 2011-7-23 21:22 |只看该作者
GOLDVIEW是带正电的,电泳时会向负极跑,导致靠近正极的一半GOLDVIEW的含量降低。3 v( Z- ~5 ^  A$ S  y! V
EB也会有相似的情况,但只要电泳时间掌握好的话是不影响的。
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发表于 2011-7-23 21:29 |只看该作者
我们实验室也是用的EB,如果跑的时间长的话是会跑掉一些的,顺便问下,EB的终浓度最优是多少啊?
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发表于 2011-7-23 22:35 |只看该作者
goodview 就是这样,条带不太漂亮,正式照片还是EB好点,goodview 如果量太大电泳条带反而变形。
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发表于 2011-7-23 22:55 |只看该作者
回复 yuanyan2010 的帖子
7 y9 g% f+ J4 s  j8 W) ?5 E
# y6 n! t; I6 A" z. U0 H' k( n呵呵呵呵。我们从来都是靠感觉。; O3 \1 w8 s8 U/ b/ X
橘子皮色的EB每20ml胶加1滴。依次类推,跟着感觉走。
& c, J: r6 b2 d, U* H9 \4 f7 P不过也没办法,EB有毒,用量小,谁也不愿意冒险费去小心翼翼地称。呵呵》》》
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发表于 2011-7-23 23:29 |只看该作者
你跑的胶有问题,跑太远了吧,一般不超过2/3全长,GOLDVIEW用的少,我们这里用EB,加入时要凉一点再加,还有人放的梳子都贴到底面了,也不行. @( J' V8 J4 ~- [" n2 U
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