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楼主: runsong
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[请教] 基于载体的miRNA抑制剂表达克隆方案   [复制链接]

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优秀会员 金话筒

21楼
发表于 2012-7-25 12:06 |只看该作者
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看了一下,是否可以总结一下:) _2 i# `3 t7 {: m+ e( q
1.对于siRNA against pre-miRNA,靶向loop的地方
8 G# e9 ~# i% m: w3 O" Q) i2.对于海绵,靶向成熟miRNA序列,串联起来。
8 H( N% \* {1 c  l% g! }有个疑问,无论对pre-miRNA还是成熟miRNA,所需序列都应该与之互补才对,为什么是原序列(siRNA合成loop序列,海绵是成熟序列重复,而非其互补序列)。
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专家 金话筒 优秀会员

22楼
发表于 2012-7-26 01:07 |只看该作者
自己构建一个月人工都不止2000了,何况还要测序。。。

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23楼
发表于 2012-8-8 21:09 |只看该作者
回复 runsong 的帖子6 u" j: H( G4 \! D

' L2 `) Q+ A! w7 U你好!目前我也在做miRNA的实验,请教你几个问题。请问你做miRNA过表达,是lipo2000转染还是构建载体,病毒转染啊?如果是病毒转染,用的载体是什么啊?谢谢啊!
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24楼
发表于 2012-8-9 11:52 |只看该作者
回复 sunny1987324 的帖子% x! ]' q' ]* o) n' M' ^  K

' X; O5 |+ x4 T2 P5 M& j其实还是做模拟物的转染吧,买上海吉玛公司的,用脂质体转染就行。质粒、病毒啥的效率低。
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25楼
发表于 2012-8-9 13:59 |只看该作者
回复 runsong 的帖子' i0 X) |2 ]6 ^
8 C# V7 ~4 u' S1 i0 r
好的,谢谢啦!
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