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楼主: runsong
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[请教] 基于载体的miRNA抑制剂表达克隆方案   [复制链接]

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发表于 2012-7-25 12:06 |只看该作者
看了一下,是否可以总结一下:9 s) j6 U/ W, {. `* v( L
1.对于siRNA against pre-miRNA,靶向loop的地方8 d2 N! p0 U8 R1 p( f2 F, S' w( G
2.对于海绵,靶向成熟miRNA序列,串联起来。
# Y! E  c/ k0 W# _' e有个疑问,无论对pre-miRNA还是成熟miRNA,所需序列都应该与之互补才对,为什么是原序列(siRNA合成loop序列,海绵是成熟序列重复,而非其互补序列)。
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专家 金话筒 优秀会员

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发表于 2012-7-26 01:07 |只看该作者
自己构建一个月人工都不止2000了,何况还要测序。。。

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发表于 2012-8-8 21:09 |只看该作者
回复 runsong 的帖子
+ I# }+ E6 U& C! B% N: L4 N$ E$ t- \3 x0 S  P$ A
你好!目前我也在做miRNA的实验,请教你几个问题。请问你做miRNA过表达,是lipo2000转染还是构建载体,病毒转染啊?如果是病毒转染,用的载体是什么啊?谢谢啊!
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发表于 2012-8-9 11:52 |只看该作者
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回复 sunny1987324 的帖子! x! M. d3 D3 y; b3 s

' [% [$ W/ _. H; @其实还是做模拟物的转染吧,买上海吉玛公司的,用脂质体转染就行。质粒、病毒啥的效率低。
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发表于 2012-8-9 13:59 |只看该作者
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2 I) \" Z) y8 Z/ Y2 X' g
3 M" a* b3 A$ n, z好的,谢谢啦!
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