淋巴因子诱导杀伤性（LAK）细胞长期培养：抗CD3、β-IL 1、IFN-γ和β的作用

deron

主题：淋巴因子诱导杀伤性（LAK）细胞长期培养：抗CD3、β-IL 1、IFN-γ和β的作用( t% b6 u5 x4 g: {2 z9 f9 \

: O3 q3 g) q; ~" Q) n' Z说明：原文来自the journal of immunology，干细胞之家新闻小组成员deron翻译（转帖请注明）0 ~: N: y  e- O1 j4 E1 ?: I, F/ ?

3 N* j5 f7 E$ l# p翻译内容：
: |( W# J/ `% q# ~3 U0 I" L淋巴因子诱导杀伤性（LAK）细胞的长期培养：抗CD3、β-IL 1、IFN-γ和β1的作用, a% G$ k( I! t! g& Z8 B/ L
外周血淋巴细胞（PBL）在含IL-2的常用组织培养基中培养，可以获得溶解新鲜肿瘤细胞的能力，这些细胞被称为淋巴因子活化的杀伤性（LAK）细胞。LAK活性在5d的培养后达到顶峰，随后急剧下降。我们研究了培养条件，并培养出能够长期培养扩增且具有LAK活性的细胞。细胞通过在相关的低密度培养和常规补充培养基及重组IL-2（r-IL 2）后，LAK功能较短期培养有显著提高，而且可以培养至少21天的同时细胞数量扩增到100倍。通过用抗CD3(OKT3)单抗和r-IL 2刺激培养物后，可以在保持类似LAK活性的同时，获得大约1000倍的扩增数量。β白介素1（β-IL 1）、干扰素β（IFN-β）或干扰素-γ（IFN-γ）的外源加入，能够增加抗CD3、r-IL2扩增细胞群的溶解活性。较目前3-5天的培养体系而言，上述改进可以让个体供者在体外培养中获得更多数量LAK细胞。' t1 B' G' ?' S  m& o5 H8 M
7 |6 m- v- [2 B/ j2 H' o( Q
原文：  

deron

这篇文章在当时应该算是一个里程碑式的改进吧,已经用到了目前CIK培养中的抗CD3和IFN。
! {/ E; A4 {$ e) l2 ^2 J/ W- L研究者在文中做了一个不错的对照
9 g& {% J! X, P: s4 u- p% _1.        单独使用IL-2和组织培养基（TCM）——获得30-100倍的扩增数量。. _$ K& ~, d% A6 X; x5 T/ `! n$ [
2.        前两天使用抗CD3抗体作为最初的刺激信号，这明显增加了有LAK细胞活性的细胞数。
' t4 p6 v1 w/ y2 [  B8 t3.        在2中的最后两天加入β-IL1、IFNβ或γ，进一步增加了LAK活性。
) |% K) A! ]  D! i5 i, F& b而且研究者已经开始使用E.coli产出的高度纯化的重组IL-2，而不是像之前那样——20%体积的IL-2……
! i9 m6 u: o# M+ u3 ]; ~9 ~& n3 a: o8 n) f之前介绍的经典方法，以1×106/ml的数量在含r-IL2的组织培养基中培养，第5d到达顶峰，第6d便急剧下降。而如果降低培养密度，以0.5×106/ml的较低密度起始培养，并每2d补充新鲜培养基和IL-2，将密度始终控制在1×106/ml以下，可以延长至14d。6 f4 S1 c; {- N- e
作者加入抗CD3后，细胞数在21d内增加了1000倍——不用抗CD3的，只扩增了100倍，差距啊～，虽说细胞数上去了，但是前5天的LAK活性确下来了，说明扩增的细胞不是LAK效应细胞，或者说抗CD3的加入延迟了LAK效应细胞的生成；或者说早期增殖的T细胞是无杀伤性细胞。但在21天的最终杀伤活性则远远超过了不加抗CD3的。
" ?& f2 ~! I; q总的来讲，这篇研究的意义在于- e, j4 e! X) r& t, X1 i5 \9 H5 @
CD3和IL2的加入，显著增加了LAK细胞活性功能( W! C( H- `8 `% ^" b7 Q. p
βIL1、IFNβ或γ，增加了培养中的细胞溶瘤活性。