- 积分
- 3700
- 威望
- 3700
- 包包
- 15164
|
这个protocol很经典,是目前很多CIK实验室的基本方案。0 \) A$ J! I% v7 S
第0d,加入1000U/ml的人rIFN-γ;24h后,加入50ng/ml抗CD3、300U/ml的IL-2和100U/ml的IL-1。每3d补充IL-2和新鲜培养基。培养基为RMPI1640+10%FBS+25mM Hepes+2mM谷氨酰胺+100U/ml青霉素+100ug/ml链霉素+50uM 2-ME。' s l& O; Y2 j4 L8 i
& _* G0 N7 x, k作者发现# H7 Y% k, N# A
同样是在第15天:IL-2单独诱导的细胞可扩增19倍;IL-2、抗CD3诱导的细胞可扩增754倍;而在第21天,加入IFN-γ和IL-1对细胞增殖毫无影响。
# d1 M ]- F4 j- v尽管抗CD3促进了增值,但并没有增加细胞的杀伤活性(不过数量上去了,总杀伤活性自然也上去了)。
" P5 \0 }, G# ~3 x. E j3 N2 u关于IFN-γ,这货对细胞杀伤活性的增强效应,只能通过在加入IL-2之前24h。在IL-2加入之后使用IFN-γ则降低了细胞杀伤力。
( I+ w1 `, R" `: B( T单独使用IL-1不会有活性的提升,但是联合IFN-γ和抗CD3,便有一个杀伤活性的加成。4 U: \0 j: P1 x T
进一步加入TNF没有明显效果。
/ p$ ]4 k* d1 `8 _3 u9 b: zCIK细胞每次培养中的杀伤力是LAK细胞的73倍。
' D/ n& d* U+ H" @" \! h" t# ^5 M# h, s5 g A1 ^0 \( w# O% P. |2 t1 v
. A6 \$ ^# [( w& c) Q! g( w+ x |
-
总评分: 威望 + 30
包包 + 50
查看全部评分
|