普通PCR验证MSC分化的问题，大家讨论讨论

如来的观音

验证MSC向神经细胞分化，选择nestin和β-3-tubulin标志物，根据（Class III β-tubulin‎ is a microtubule element expressed exclusively in neurons, and is a popular identifier specific for neurons in nervous tissue.http://en.wikipedia.org/wiki/Tubulin）介绍β-3-tubulin只在神经细胞中表达，为什么会出现。。。？（是不是也考虑培养MSC过程中已经出现分化了，tubulin组左侧第一条亮带为阴性对照组MSC，其余为不同分化时间点的）
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Marker为700/600/500/400/300/200/100，nestin组左侧为阴性对照组MSC（nestin不是神经细胞特有的吗），怎么会出现亮带？和分化组感觉还没什么区别，是不是考虑培养MSC过程中已经出现分化了？（但是镜下观察没有见到形态变化呢，图片未保存）。大家支个招看看，谢谢

savid888

不要用PCR验证，不可靠

luwei8157

其实有些干细胞本身是表达nestin等神经标志物 ，比如SHED（脱落乳牙干细胞）' t# V4 O& `5 k
神经嵴来源的一些细胞都有可能表达，所以你可以用定量PCR检测以及免疫细胞化学检测，和western blot再证明等。

tjutiger

MSC 本身会有部分表达nestin的，可以查阅相关文献，有很多的。记得刚有一篇nature，说的就是nestin阳性MSC是HSC的niche。呵呵

aminhair

看你的目的条带大小是200多bp。不知道你批得是RNA还是基因组？要是RNA得话会存在基因组污染而导致批出条带。因此做RT-PCR时引物得设计必须是跨越至少一个内含子。以防止基因组上的序列污染。