用无血清培养液养脐带间充质干细胞

chemjumao

用无血清培养液养脐带间充质干细胞已近5个月。我们用Lonza公司的UItraCULTURE  12-725F 无培养液 。开始时一个贴壁细胞都不长，后来加了2mmol/l 谷氨酰胺，用组织块贴壁法就能培养出贴壁细胞来。约12天左右每根脐带都能长。但细胞很快就变圆脱落死亡。不知是什么原因？ 希望能得到大家的帮助。谢谢！$ B" p: r% e: _$ N1 v+ E8 ]4 @; m( J
, _% Q) U& s) k  h% P" H4 L

神经干

贴壁不好，为什么不用有血清培基啊，用组织块贴壁顶多一个周就爬出来了，而且贴的特别牢

yinjiqingqq

强烈要求上图！

君鸿

我是做胎盘间充质干细胞的，我们也试图做无血清培养，查了很多资料，和一些相关了解，首先要确认细胞的代次，最好是P5以前，细胞的增值和贴壁是很好的，细胞的无血清培养是一个循序渐进的过程，在细胞复苏时最好还是用10%到12%的血清最好，以后传代慢慢递减，这样细胞有一个适应的过程，另外无血清培养的成本相当高，现在一般都是买现成无血清培养基，其成分不一定可靠，最好是自己研发配用，既节约了成本又有了质量保证，目前我们正在做，等有了结果会与大家一起分享。

一转身的距离

回复 君鸿 的帖子5 I- c( x, X- S
/ l: O0 }/ I( S
你好，请问你做的是胎盘的什么间充质细胞？

1301918986

回复 神经干 的帖子$ A0 e9 E$ ]; z; S* h! D+ N) a
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你们组织块贴壁一个星期就爬出来了啊，我们的每次做都要十几天呢。

chemjumao

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* S+ w5 o& {1 \* q' \
" s" `& n8 \+ ^. g开始设计科题时为避免不必要的异体旦白反应，所以尽可能不用有血清培基，也不轻易加细胞因子。这样在培养细胞时就增添了不少的困难。辛苦啊！
! k! l) _7 s& u% c; Z3 ]; r* R8 x) r$ s: U5 y9 Z( `

chemjumao

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6 a3 B5 \# O$ h1 q% U
* A( D& |+ c& w, i, C" [本人非常赞同自己研发配用无血清培养液。但没有厚实的软硬件基础是不容易搞出来的。只好等你们有了结果一起分享。在此先谢啦！

君鸿

我们是取胎盘小叶用来做间充质，经过培养筛选，流式检测后确认为间充质干细胞，就培养到P6供临床使用。直接给病人静脉注射- ^6 h. K6 d, ?# w5 G: O( Y

haibara007007

说实话如果无血清培养，组织块法干细胞生长确实比较困难
' X( L3 P, ]& n  `- k5 l. D- N研究题目的要求来说是比较困难的) W$ r( Y3 u! L; ~4 ^- ?# J* [
建议原代使用含血清培养基