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楼主: 仁心仁术
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[请教] 铺板时如何才能把细胞铺均匀??   [复制链接]

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发表于 2012-2-27 19:19 |只看该作者
居然没人说到经典的8字晃匀法!端着dish或者板,想象超净台上面有个“8”形(横着)的轨道(大小和速度取决于你的孔的大小)画8字画8次左右,最后在十字晃两下,无论一开始你的细胞是怎么加进去的,最后一般都是匀的 :)
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发表于 2012-2-27 20:18 |只看该作者
十字揺匀可行,但左右和前后摇匀之间要停一下,等培养基静止一下,否则会容易形成旋涡
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发表于 2012-2-28 10:36 |只看该作者
本帖最后由 holywater 于 2012-2-28 10:38 编辑
" Q& z; a/ p8 L; t$ d! [# a: B" [- y- M( E2 w7 H- O3 E
我这么说吧,你那十字不是标准十字,是做了些轻微的圆周运动,结果中间有了漩涡。然后就是那样子了- \  U% V" m  g' N/ o& V
; o, ^0 |0 h* m0 ~7 P, Y+ D- I
解决方法有一个简单的一个难的。 难的是保持良好的十字,或者干脆前后左右翻转板来代替你手划十字
8 Y0 J1 Q# x2 l7 P' E                                简单的是细胞悬液先和新鲜培养基混匀再去种版,那么这种问题很好解决
( H8 e$ p& \# b( L" P
$ X1 G, X" E! B- W                             另外,根据我的经验,6孔板是最好的,可以十字混,大于这个就非常容易中心旁边不一了,而小于这个没法用手晃混匀嘛6 W8 e* F2 ]5 R/ O
                        
$ D% Y$ x8 Z5 ^; d6 z- u, h                 最好还是先混再种版,问题全解决了  Y7 R5 F% M' p+ M  }

$ Y* d$ a, _% \  a5 E0 |
+ l% N: E! l/ f  C% m$ x% V求威望
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发表于 2012-2-28 13:39 |只看该作者
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回复 future007 的帖子* |! x4 e# |3 H4 k$ g( f1 T$ }  ~4 d
; j. F; y0 U( m( N  j
弱弱的问,贴壁加还是直接加到培养液里?
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发表于 2012-2-28 17:24 |只看该作者
铺板均匀的前提是铺前细胞悬液是均匀的,不然后面怎么摇都不会均匀的。0 `& n8 T' Y$ P* `
楼主可以用大一点的安瓿瓶,将细胞在里面反复吹打混匀,一边铺板一边混匀,动作要迅速,板铺好后贴着桌面十字摇匀就可以了。
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发表于 2012-2-28 17:35 |只看该作者
12、24或48孔板,由于体积小,液体移动空间有限,用十字摇法不容易摇匀。你可以在把细胞加上后,用蓝枪头把整个的细胞和培养基吸上来再吹下去,反正里面培养基也不多。只要不快速吹打,不会对细胞造成伤害,就能混匀。
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