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楼主: 仁心仁术
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[请教] 铺板时如何才能把细胞铺均匀??   [复制链接]

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发表于 2012-2-27 19:19 |只看该作者
居然没人说到经典的8字晃匀法!端着dish或者板,想象超净台上面有个“8”形(横着)的轨道(大小和速度取决于你的孔的大小)画8字画8次左右,最后在十字晃两下,无论一开始你的细胞是怎么加进去的,最后一般都是匀的 :)
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发表于 2012-2-27 20:18 |只看该作者
十字揺匀可行,但左右和前后摇匀之间要停一下,等培养基静止一下,否则会容易形成旋涡
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发表于 2012-2-28 10:36 |只看该作者
本帖最后由 holywater 于 2012-2-28 10:38 编辑 : H" `! a' Z: _; K( }0 ?" A6 X

6 F7 j$ N# {! u5 @9 c& Q% {我这么说吧,你那十字不是标准十字,是做了些轻微的圆周运动,结果中间有了漩涡。然后就是那样子了
' a0 N8 \" ~- m) W& L, j  K: S# L" W2 a# O4 \  I" k( K
解决方法有一个简单的一个难的。 难的是保持良好的十字,或者干脆前后左右翻转板来代替你手划十字9 u" j) n: }) ^9 Z, u0 e, Z# ^
                                简单的是细胞悬液先和新鲜培养基混匀再去种版,那么这种问题很好解决! z6 i+ W4 ?5 T
2 C7 g# @6 o; I" C9 @
                             另外,根据我的经验,6孔板是最好的,可以十字混,大于这个就非常容易中心旁边不一了,而小于这个没法用手晃混匀嘛8 ?6 a! |# s% H( w. Z
                        
- C1 p  e- a! `                 最好还是先混再种版,问题全解决了
" @( ^3 X6 x7 k; e3 i
: H2 S0 `  K4 h$ Y7 W7 @: J3 |+ M  G8 Y0 a7 i' D
求威望
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发表于 2012-2-28 13:39 |只看该作者
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+ s! @: d+ H. P" [% w* G
( S2 j% [: v, C5 z" s) o弱弱的问,贴壁加还是直接加到培养液里?
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发表于 2012-2-28 17:24 |只看该作者
铺板均匀的前提是铺前细胞悬液是均匀的,不然后面怎么摇都不会均匀的。
- |  ~  Q4 n; o; o+ w楼主可以用大一点的安瓿瓶,将细胞在里面反复吹打混匀,一边铺板一边混匀,动作要迅速,板铺好后贴着桌面十字摇匀就可以了。
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发表于 2012-2-28 17:35 |只看该作者
12、24或48孔板,由于体积小,液体移动空间有限,用十字摇法不容易摇匀。你可以在把细胞加上后,用蓝枪头把整个的细胞和培养基吸上来再吹下去,反正里面培养基也不多。只要不快速吹打,不会对细胞造成伤害,就能混匀。
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