ips全军覆没，我该怎么办？

oucflora

回复 rongrong 的帖子
# c& ^2 o  ?# U' C; |5 `6 s* K7 a
, H4 ]4 Z) i3 ]5 i3 @20%,曾经一个师兄用过更高的浓度，大概30%，细胞情况也挺好。

oucflora

回复 rongrong 的帖子
8 a' b4 v7 p3 _. u/ j! H6 I1 }( _
在-80度放置两天对细胞成活率影响不大，倒是液氮量特别少，会导致细胞死亡较多。
: `8 U0 o6 G, b! `* T5 |
% U; Q/ S0 Q* ^* Y# A补充内容 (2011-9-5 20:27):
0 g0 F, L4 H) ~' m9 \' |不过如果你们的液氮罐是保温较好的进口的话，影响倒是不大
2 k7 y0 Z6 x; d) j' k" J
+ V& j" Z$ E* }5 v8 c; V补充内容 (2011-9-5 20:28):
8 P; L# u) G" X% V% }! ?“进口”的意思是“非国产”

evial

FBS：DMSO=9:1你的浓度低了

rongrong

回复 张也行 的帖子- A0 C6 D/ I6 v9 Z

. n2 D2 g8 j) Q4 H7 H恩，好的，谢谢鼓励啊，继续前行再接再厉

jiefengbing

回复 cicadacjk 的帖子! x0 [! m' W8 Z

! F) A5 o# I- N& F; P- P. Nwicell 复苏ES不需要离心？正好我手头上有一份，200g离心5min,然后gently re-suspend cell pellet.不知道您的步骤是哪个版本，可否让我看看？

hnczlw48005

复苏温度应该在37°，冻存干细胞时的血清很重要，最好用进口血清，浓度越高越好，可以用90%FBS+10%DMSO作为冻存液。

yangel

rongrong 发表于 2011-9-4 11:45 2 ?$ E* x5 i4 @* t
大家好，我是一个IPS的培养新手，我4月份冻存了一支ips，冻存液干细胞的全培养基+FBS+DMSO=6:3:1，复苏时铺 ...

) E- d, u. T: n1 C* l+ e0 }* g做的没错！复苏成这个现象也正常，再养几天看看有没有小的ips clusters长出来。要提高复苏效果的话用Y-27632处理24h。