ips全军覆没，我该怎么办？

oucflora

回复 rongrong 的帖子* E% y& l5 @- |% H$ d3 P

2 a8 b1 K7 r' F1 ~0 W20%,曾经一个师兄用过更高的浓度，大概30%，细胞情况也挺好。

oucflora

回复 rongrong 的帖子
* P8 N3 Z* W# W3 t- i; ?- i" b* Z) X, v9 _
在-80度放置两天对细胞成活率影响不大，倒是液氮量特别少，会导致细胞死亡较多。8 M4 v/ q" Z1 ^
' B" X- \% d9 j
补充内容 (2011-9-5 20:27):- H9 }9 Y* |6 l) ^, S  C
不过如果你们的液氮罐是保温较好的进口的话，影响倒是不大' _) q' O4 z$ t3 f/ v. {

# z8 f% @) T" p/ q, T5 X4 V; j补充内容 (2011-9-5 20:28):. P3 Y5 W3 v+ X
“进口”的意思是“非国产”

evial

FBS：DMSO=9:1你的浓度低了

rongrong

回复 张也行 的帖子
& f1 Y- R: r( t% }  G0 x" U( d( P* L$ K: P
恩，好的，谢谢鼓励啊，继续前行再接再厉

jiefengbing

回复 cicadacjk 的帖子5 _" r5 s6 w0 s7 E; \' L
' a9 j- s3 G# E. I* S! P0 o5 l$ R- A
wicell 复苏ES不需要离心？正好我手头上有一份，200g离心5min,然后gently re-suspend cell pellet.不知道您的步骤是哪个版本，可否让我看看？

hnczlw48005

复苏温度应该在37°，冻存干细胞时的血清很重要，最好用进口血清，浓度越高越好，可以用90%FBS+10%DMSO作为冻存液。

yangel

rongrong 发表于 2011-9-4 11:45
$ E: Z% s# A6 G6 S3 r大家好，我是一个IPS的培养新手，我4月份冻存了一支ips，冻存液干细胞的全培养基+FBS+DMSO=6:3:1，复苏时铺 ...

3 n2 g2 h* d) N
做的没错！复苏成这个现象也正常，再养几天看看有没有小的ips clusters长出来。要提高复苏效果的话用Y-27632处理24h。