ips全军覆没，我该怎么办？

oucflora

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, x, p* d9 c9 s* ^, S! M( [5 z3 ^" W0 S8 D* P
20%,曾经一个师兄用过更高的浓度，大概30%，细胞情况也挺好。

oucflora

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/ ]% c9 o. z+ K
9 E$ u; m& p! N在-80度放置两天对细胞成活率影响不大，倒是液氮量特别少，会导致细胞死亡较多。. B/ G% q# t9 K2 q) s
, l( `3 V: |. |  D! X
补充内容 (2011-9-5 20:27):' I4 M0 {2 N, V2 x. Z4 I) R1 o
不过如果你们的液氮罐是保温较好的进口的话，影响倒是不大
8 C; w  O4 `& N
/ }7 B% _8 j. }$ S/ N1 T2 K7 o0 J补充内容 (2011-9-5 20:28):
6 R7 a/ m8 r4 T( L4 t* ]“进口”的意思是“非国产”

evial

FBS：DMSO=9:1你的浓度低了

rongrong

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. l+ v! L+ Y( K+ z, v7 N$ ~7 z$ }
# O9 L+ |9 N* _# Y/ |# g/ f恩，好的，谢谢鼓励啊，继续前行再接再厉

jiefengbing

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1 J3 B0 I, `% t" }7 G3 W6 b+ Y. O) S" x+ ^" n+ d( T- e
wicell 复苏ES不需要离心？正好我手头上有一份，200g离心5min,然后gently re-suspend cell pellet.不知道您的步骤是哪个版本，可否让我看看？

hnczlw48005

复苏温度应该在37°，冻存干细胞时的血清很重要，最好用进口血清，浓度越高越好，可以用90%FBS+10%DMSO作为冻存液。

yangel

rongrong 发表于 2011-9-4 11:45
  z: q; J7 F& v大家好，我是一个IPS的培养新手，我4月份冻存了一支ips，冻存液干细胞的全培养基+FBS+DMSO=6:3:1，复苏时铺 ...

5 B4 m2 L) ^# g做的没错！复苏成这个现象也正常，再养几天看看有没有小的ips clusters长出来。要提高复苏效果的话用Y-27632处理24h。