ips全军覆没，我该怎么办？

oucflora

回复 rongrong 的帖子9 j) c8 \) B* J% t6 H

4 f+ y# P/ Y! |20%,曾经一个师兄用过更高的浓度，大概30%，细胞情况也挺好。

oucflora

回复 rongrong 的帖子: |; W4 C. M' k5 E3 }" o9 R# Z8 W
  h' ]0 Q2 g. ?7 g
在-80度放置两天对细胞成活率影响不大，倒是液氮量特别少，会导致细胞死亡较多。
" A) t( }; p6 G) R" u
& E# Y6 r% g2 @" o: d9 f补充内容 (2011-9-5 20:27):4 @& L+ b7 i! {& g7 O
不过如果你们的液氮罐是保温较好的进口的话，影响倒是不大! R. [0 c) L8 R1 ]6 V
( {8 w. ^2 {4 c* y& ?; t& U2 _
补充内容 (2011-9-5 20:28):) i- G4 h% k$ U
“进口”的意思是“非国产”

evial

FBS：DMSO=9:1你的浓度低了

rongrong

回复 张也行 的帖子
: [) L* m5 l8 q# R. l5 A: P$ j& ]3 r  J5 i% P
恩，好的，谢谢鼓励啊，继续前行再接再厉

jiefengbing

回复 cicadacjk 的帖子4 @, G6 Y6 Y8 Q
# j6 s0 U- ]! I' p  D  M8 e) j
wicell 复苏ES不需要离心？正好我手头上有一份，200g离心5min,然后gently re-suspend cell pellet.不知道您的步骤是哪个版本，可否让我看看？

hnczlw48005

复苏温度应该在37°，冻存干细胞时的血清很重要，最好用进口血清，浓度越高越好，可以用90%FBS+10%DMSO作为冻存液。

yangel

rongrong 发表于 2011-9-4 11:45
; d0 ?* f! P/ S9 x大家好，我是一个IPS的培养新手，我4月份冻存了一支ips，冻存液干细胞的全培养基+FBS+DMSO=6:3:1，复苏时铺 ...

$ g& C  J/ w; j+ I9 F- P! B
做的没错！复苏成这个现象也正常，再养几天看看有没有小的ips clusters长出来。要提高复苏效果的话用Y-27632处理24h。