神经干细胞怎么那么难养呢！！

yangwy028

神经干细胞喜欢集落生长，大到100微米就该传代了。它的贴壁性不是很好。是不是倒废液的时候把一些细胞倒掉了？另外进口的细胞因子的质量明显要优于国内的哦

smkx

检查你的B27是否有问题，不妨用再用下N2培养试试

天山飞鹤

再加N2和谷氨酰胺试试，另外机械分离比消化酶损伤下，前提是要操作轻柔减少损伤

愤怒的小鸟

回复 angelyannan 的帖子* B5 U8 Y' i! G
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版主~~~~请教下哈，神经球的免疫荧光怎么做啊，看的都是PLL过夜处理玻片，收集到的NSC直接滴到玻片上，然后剩下就是免疫荧光的正常步骤，不知道还有什么要注意的没，麻烦版主赐教啊

angelyannan

回复 愤怒的小鸟 的帖子6 R! \/ L4 \3 |/ ]' b+ ?1 g  l! L
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以前做过的，是收集大概直径为100um左右的神经球接种到PDL包被的孔板里面，贴壁培养大概6h以后做正常的免疫衣荧光。个人觉得贴壁培养的时间需要摸索，贴壁不紧的话后面免疫荧光步骤中细胞很容易被吸走。

愤怒的小鸟

回复 angelyannan 的帖子5 m# y1 [" j7 z' C. g# s5 k
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嗯嗯嗯  O(∩_∩)O谢谢

caiwwcom

angelyannan 发表于 2011-11-21 13:21
! q; r! U* N( t  [3 }6 l% V2 G回复 愤怒的小鸟 的帖子
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8 B2 q+ M* r7 q7 a0 t以前做过的，是收集大概直径为100um左右的神经球接种到PDL包被的孔板里面，贴壁培 ...

/ w# ~6 I; i; ~( F3 q请问下直接用神经球吗，不需要单个细胞吗

pipi168

最好加神经生长因子，还有Vitc，这样就好多了

angelyannan

回复 caiwwcom 的帖子' P, _3 D3 e* L, H( S/ [2 F
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我回答的是指神经干细胞的鉴定-nestin染色，而且我回复的帖子是说神经球的免疫荧光。当然要是贴壁的也可以的~看目的是什么了。

影像就是影响

请问你用全脑培养神经干细胞，最后结果怎么样