神经干细胞怎么那么难养呢！！

yangwy028

神经干细胞喜欢集落生长，大到100微米就该传代了。它的贴壁性不是很好。是不是倒废液的时候把一些细胞倒掉了？另外进口的细胞因子的质量明显要优于国内的哦

smkx

检查你的B27是否有问题，不妨用再用下N2培养试试

天山飞鹤

再加N2和谷氨酰胺试试，另外机械分离比消化酶损伤下，前提是要操作轻柔减少损伤

愤怒的小鸟

回复 angelyannan 的帖子6 n- _9 L  Q  X# X& c9 \# a

% ~+ w6 A( s! z. S1 g  P) V4 c版主~~~~请教下哈，神经球的免疫荧光怎么做啊，看的都是PLL过夜处理玻片，收集到的NSC直接滴到玻片上，然后剩下就是免疫荧光的正常步骤，不知道还有什么要注意的没，麻烦版主赐教啊

angelyannan

回复 愤怒的小鸟 的帖子
* w$ A; h! z% h3 C3 ]0 l2 E! H8 f# e4 j! u9 y+ q. W. E
以前做过的，是收集大概直径为100um左右的神经球接种到PDL包被的孔板里面，贴壁培养大概6h以后做正常的免疫衣荧光。个人觉得贴壁培养的时间需要摸索，贴壁不紧的话后面免疫荧光步骤中细胞很容易被吸走。

愤怒的小鸟

回复 angelyannan 的帖子2 O0 r. a; `) q
- g* u8 U2 j+ p# b' L9 f+ X
嗯嗯嗯  O(∩_∩)O谢谢

caiwwcom

angelyannan 发表于 2011-11-21 13:21
; s5 t  f, w0 V' ]1 D. V% A! o回复 愤怒的小鸟 的帖子
: I- b4 T/ V8 q6 |* d3 `0 n" ]! ~% N8 D- s6 }' ?
以前做过的，是收集大概直径为100um左右的神经球接种到PDL包被的孔板里面，贴壁培 ...

0 H1 b. w! {( g0 U% z/ z7 I5 ]请问下直接用神经球吗，不需要单个细胞吗

pipi168

最好加神经生长因子，还有Vitc，这样就好多了

angelyannan

回复 caiwwcom 的帖子; Z, @" ^! u; X) ]
" m& S6 A4 p0 P7 P
我回答的是指神经干细胞的鉴定-nestin染色，而且我回复的帖子是说神经球的免疫荧光。当然要是贴壁的也可以的~看目的是什么了。

影像就是影响

请问你用全脑培养神经干细胞，最后结果怎么样